Struktur der aktiven Konformation des Arrestins

视紫红质抑制蛋白活性构象的结构

• 批准号: 5428867
• 负责人: Professor Dr. Oliver-Peter Ernst
• 金额: --
• 依托单位: Department of Biochemistry
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2003-12-31 至 2005-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5428867?language=en
• 关键词: Struktur; der; aktiven; Konformation; des

Die Deaktivierung von licht-aktiviertem Rhodopsin, dem Sehpigment und Namensgeber der Klasse der Rhodopsin-ähnlichen GPCRS, erfolgt über einen Zwei-Schritt-Mechanismus, der die Phosphorylierung des Rhodopsins durch seine Kinase und anschließende Bindung des regulatorischen Proteins Arrestin an den Rezeptor beinhaltet. Die Arrestin-Familie umfasst Arrestin, dessen C-terminal trunkierte Spleißvariante p44, und zwei b-Arrestine, die mit anderen GPCRs interagieren. Arrestin ändert die Konformation seines C-Terminus beim Kontakt mit licht-aktiviertem phosphoryliertem Rhodopsin, um selektiv diese Rezeptorform binden zu können. Im Gegensatz dazu bindet p44 auch an nicht-phosphoryliertes aktiviertes Rhodopsin. Man nimmt an, dass Arrestin und p44 in zwei Konformationen existieren, einer inaktiven und einer aktiven, die in der Lage ist, den aktivierten GPCR zu binden. Die Kristallstrukturen von Arrestin und b-Arrestin sind gelöst, und es wird allgemein angenommen, dass alle bislang bekannten Strukturen die inaktive Konformation repräsentieren. In diesem Antrag wollen wir die Struktur des visuellen Arrestins in der aktiven Konformation lösen, indem wir Protein Engineering einsetzen und verschiedene Ansätze zur Stabilisierung der aktiven Konformation während der Kristallisation verfolgen. Diese Arbeit soll auch die Basis darstellen für nachfolgende Strukturuntersuchungen des lichtaktivierten Rhodopsins im Komplex mit p44 oder Arrestin.

光激活视紫红质的去激活、色素色素和视紫红质 GPCRS 分类的名称、Zwei-Schritt 机制、丝氨酸激酶中视紫红质的磷酸化和调节器的绑定 蛋白质 Arrestin 和 Rezeptor beinhaltet。 Arrestin-Familie umfasst Arrestin，由 Spleißvariante p44 的 C 末端 trunkierte Spleißvariante p44 和两个 b-Arrestine 组成，与其他 GPCR 相结合。抑制和控制 C 端的结构，使其与光激活的磷酸化视紫红质接触，并通过选择 Rezeptorform 结合。 Im Gegensatz dazu binde p44 auch an nicht-磷酸化活性视紫红质。 Man nimmt an, dass Arrestin und p44 in the zwei Konformationen Existieren, einer inaktiven und einer aktiven, die in der Lage ist, den aktivierten GPCR zu Binden.逮捕的水晶结构和逮捕的罪名，以及所有的全部规定，都属于无效的结构代表。在这个过程中，视觉结构的约束力被限制在活动信息中，同时蛋白质工程和晶体化的活动信息的稳定性也得到了改善。该工作是基于 p44 或 Arrestin 复合物中的视紫红质结构的基础。