有鉤条虫の比較ゲノム解析に基づく組織指向性の解明および遊離型ＤＮＡ検査法の開発

基于猪带绦虫比较基因组分析阐明组织向性并开发游离 DNA 检测方法

• 批准号: 14F04103
• 负责人: 迫 康仁
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-25 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14F04103/
• 关键词: 有鉤条虫; ゲノム解析; DNA検出; 血清; DNA検出法; マルチプレックスLAMP

有鉤嚢虫症はテニア科条虫に属する有鉤条虫の幼虫の寄生に起因し、時に脳に寄生することにより致死的病態を引き起こす。有鉤嚢虫症は、ラテンアメリカでは脳内寄生のみによるものが大多数であるのに対し、アジアでは、脳内と他組織（主に皮下、筋肉）への寄生によるものが通常である。このような病態の差異を生じさせる組織指向性に関して、なぜアメリカ分離株とアジア分離株間で異なっているのか明確な解答は得られていない。そこで、ゲノムの塩基配列を株間で比較することにより、組織指向性を規定する因子の探索を試みた。同時に、血清中の寄生虫由来DNA検出法の確立を試みた。有鉤条虫のゲノム塩基配列を決定するために、タイ分離株では約12G、インドネシア分離株では約10Gの塩基配列データを取得することが出来た。アセンブルソフトAbyssならびにVelvetを用いてアセンブルを実施した結果、タイ分離株においては、Abyssでは最長鎖長820,191bp、velvetでは最長鎖長479,322bpの塩基配列が、インドネシア分離株においてはAbyssでは最長鎖長820,084bp、velvetでは最長鎖長479,322bpの塩基配列がアセンブルされた。今回得られた鎖長は短いため、全塩基配列を得るためにはさらなる塩基配列の取得が必要と考えられた。有鉤嚢虫感染ブタの血清虫に寄生虫由来のDNAが存在するか否かを確認する必要があるが、有鉤嚢虫感染ブタ血清を日本で調整することはきわめて困難である。そこで、有鉤嚢虫と同様に血管外寄生する条虫である多包虫を用いて、血管外寄生虫由来DNAの血清からの検出を試みた。多包虫が腹腔内に寄生しているマウスから血液を経時的に採取し、血清中の多包虫由来DNAの有無をPCR法にて確認した。その結果、PCRを2回実施することにより、マウス血清からPCR産物を得ることが出来た。

Ancylostosis is caused by parasitism of the larvae of Ancylostidae and is caused by parasitism of the larvae of Ancylostidae. It is a morbid and fatal disease caused by parasitism. There are cases of hookworm disease, endoparasitic diseases of the larvae, most of them , アジアでは, 脳内と Other tissues (mainly subcutaneous, muscles) and へのparasitic によるものが usually である.このような Pathological difference を生じさせるTissue directionality に关して、なぜアメリカ分とアジアisolated strains are different from each other and the answers are clear and clear.そこで, ゲノムの塩塩婩婩婩　　　　　　　　　　　　　　　　　　　, 　　　　, 　　　　　　, 　　　　　　　　, 　　　　　　　　, 　　　　　　　　, 　　　　　　　　　　　　　　　logue 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 targeted you in At the same time, we have established a test method for extracting DNA from parasites in serum. Ancylostoma のゲノム桩塩综合をdeterminationするために、タイisolated strainではabout 12G、イThe ンドネシア isolate is about 10G of の塩base array and obtained from することが.アセンブルソフトAbyssならびにVelvetを用いてアセンブルを実士したRESULT,タイThe longest lock length of isolate においては, Abyss では is 820,191bp, and the longest lock length of velvet では is 4 79,322 bp の塩塩综合が、インドネシア isolate においてはAbyssではThe longest lock length is 820 , 084bp, velvet's longest lock length is 479, 322bp's の塩がアセンブルされた. This time, it is necessary to obtain the long and short locks, and the necessary and necessary test for the full range of bases. There is no need to confirm the existence of the DNA of the origin of the serological parasite of hookworm infection. It is difficult to adjust the serum of hookworm infection in Japan.そこで, there are hookworms and ectoparasites, ectovascular parasitism, ectoparasites, multiple hydatid parasites, ectoparasites, DNA のserum, からの検出みた. When multiple hydatid parasites are parasitic in the abdominal cavity, the blood is collected and the presence or absence of DNA derived from multiple hydatid in the serum is confirmed by PCR.その results, PCR を 2 times 実士することにより, マウス serum からPCR product をget ることが came out.

项目成果

Simple Identification of Human Taenia Species by Multiplex Loop-Mediated Isothermal Amplification in Combination with Dot Enzyme-Linked Immunosorbent Assay.

• DOI: 10.4269/ajtmh.15-0829
• 发表时间: 2016-06
• 期刊: The American journal of tropical medicine and hygiene
• 作者: A. Nkouawa;Y. Sako;M. Okamoto;A. Ito

Cryptic diversity in hymenolepidid tapeworms infecting humans

感染人类的​​膜脂绦虫的隐秘多样性

• DOI: 10.1016/j.parint.2015.10.009
• 发表时间: 2016
• 期刊: Parasitol Int
• 影响因子: 1.9
• 作者: Nkouawa A;Haukisalmi V;Li T;Nakao M;Lavikainen A;Chen X;Henttonen H;Ito A
• 通讯作者: Ito A

Development of a simple identification of human Taenia species by using multiplex LAMP and dot-ELISA.

使用多重 LAMP 和 dot-ELISA 开发人类带绦虫物种的简单鉴定方法。

• 发表时间: 2015
• 作者: Nkouawa Agathe;Ito Akira;Sako Yasuhito
• 通讯作者: Sako Yasuhito

Evaluation of a new immunochromatographic test using recombinant antigen B8/1 for the diagnosis of cystic echinococcosis

使用重组抗原 B8/1 的新型免疫层析检测诊断囊型包虫病的评价

• DOI: 10.1128/jcm.02157-15
• 发表时间: 2015
• 期刊: J Clin Microbiol
• 影响因子: 9.4
• 作者: Santivanez SJ;Rodriguez ML;Rodriguez S;Sako Y;Nkouawa A;Kobayashi Y;Sotomayor AL;Peralta JE;Valcarcel M;Gonzalez AE;Garcia HH;Ito A
• 通讯作者: Ito A

Seroprevalence and risk factors of human cysticercosis and taeniasis prevalence in a highly endemic area of epilepsy in Bangoua, west Cameroon

• DOI: 10.1016/j.actatropica.2015.12.019
• 发表时间: 2017-01-01
• 期刊: ACTA TROPICA
• 影响因子: 2.7
• 作者: Nkouawa, Agathe;Dschanou, Armel Romeo;Ito, Akira
• 通讯作者: Ito, Akira