有鉤条虫の比較ゲノム解析に基づく組織指向性の解明および遊離型ＤＮＡ検査法の開発

基于猪带绦虫比较基因组分析阐明组织向性并开发游离 DNA 检测方法

• 批准号: 14F04103
• 负责人: 迫 康仁
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-25 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14F04103/
• 关键词: 有鉤条虫; ゲノム解析; DNA検出; 血清; DNA検出法; マルチプレックスLAMP

有鉤嚢虫症はテニア科条虫に属する有鉤条虫の幼虫の寄生に起因し、時に脳に寄生することにより致死的病態を引き起こす。有鉤嚢虫症は、ラテンアメリカでは脳内寄生のみによるものが大多数であるのに対し、アジアでは、脳内と他組織（主に皮下、筋肉）への寄生によるものが通常である。このような病態の差異を生じさせる組織指向性に関して、なぜアメリカ分離株とアジア分離株間で異なっているのか明確な解答は得られていない。そこで、ゲノムの塩基配列を株間で比較することにより、組織指向性を規定する因子の探索を試みた。同時に、血清中の寄生虫由来DNA検出法の確立を試みた。有鉤条虫のゲノム塩基配列を決定するために、タイ分離株では約12G、インドネシア分離株では約10Gの塩基配列データを取得することが出来た。アセンブルソフトAbyssならびにVelvetを用いてアセンブルを実施した結果、タイ分離株においては、Abyssでは最長鎖長820,191bp、velvetでは最長鎖長479,322bpの塩基配列が、インドネシア分離株においてはAbyssでは最長鎖長820,084bp、velvetでは最長鎖長479,322bpの塩基配列がアセンブルされた。今回得られた鎖長は短いため、全塩基配列を得るためにはさらなる塩基配列の取得が必要と考えられた。有鉤嚢虫感染ブタの血清虫に寄生虫由来のDNAが存在するか否かを確認する必要があるが、有鉤嚢虫感染ブタ血清を日本で調整することはきわめて困難である。そこで、有鉤嚢虫と同様に血管外寄生する条虫である多包虫を用いて、血管外寄生虫由来DNAの血清からの検出を試みた。多包虫が腹腔内に寄生しているマウスから血液を経時的に採取し、血清中の多包虫由来DNAの有無をPCR法にて確認した。その結果、PCRを2回実施することにより、マウス血清からPCR産物を得ることが出来た。

The cause of parasitism of the larvae of T. hookeri is due to the occurrence of a fatal disease. There are many kinds of parasitic diseases, such as parasitic diseases, parasitic diseases, The difference between the two isolates is related to the tissue orientation, and the difference between the two isolates is clearly explained. Comparison between plants in terms of gene alignment and tissue orientation At the same time, the establishment of DNA detection method for the origin of parasites in serum was tried. The gene alignment of T. hookeri is determined by the gene alignment of T. hookeri isolates at about 12G and T. hookeri isolates at about 10G. The results showed that the longest lock length of the mutant was 820,191bp for Abyss and 479,322bp for Velvet. The longest lock length of the mutant was 820,084bp for Abyss and 479, 322bp for Velvet. Now we have to find out how long the lock is. The existence of DNA from serological parasites infected with hookworm is necessary and difficult to confirm. The serum from which the extravascular parasite originated was detected. Polyhydatid parasites in the abdominal cavity were detected by PCR and the origin of polyhydatid DNA in serum was confirmed. The PCR product was obtained from the serum.

项目成果

Simple Identification of Human Taenia Species by Multiplex Loop-Mediated Isothermal Amplification in Combination with Dot Enzyme-Linked Immunosorbent Assay.

• DOI: 10.4269/ajtmh.15-0829
• 发表时间: 2016-06
• 期刊: The American journal of tropical medicine and hygiene
• 作者: A. Nkouawa;Y. Sako;M. Okamoto;A. Ito

Cryptic diversity in hymenolepidid tapeworms infecting humans

感染人类的​​膜脂绦虫的隐秘多样性

• DOI: 10.1016/j.parint.2015.10.009
• 发表时间: 2016
• 期刊: Parasitol Int
• 影响因子: 1.9
• 作者: Nkouawa A;Haukisalmi V;Li T;Nakao M;Lavikainen A;Chen X;Henttonen H;Ito A
• 通讯作者: Ito A

Development of a simple identification of human Taenia species by using multiplex LAMP and dot-ELISA.

使用多重 LAMP 和 dot-ELISA 开发人类带绦虫物种的简单鉴定方法。

• 发表时间: 2015
• 作者: Nkouawa Agathe;Ito Akira;Sako Yasuhito
• 通讯作者: Sako Yasuhito

Evaluation of a new immunochromatographic test using recombinant antigen B8/1 for the diagnosis of cystic echinococcosis

使用重组抗原 B8/1 的新型免疫层析检测诊断囊型包虫病的评价

• DOI: 10.1128/jcm.02157-15
• 发表时间: 2015
• 期刊: J Clin Microbiol
• 影响因子: 9.4
• 作者: Santivanez SJ;Rodriguez ML;Rodriguez S;Sako Y;Nkouawa A;Kobayashi Y;Sotomayor AL;Peralta JE;Valcarcel M;Gonzalez AE;Garcia HH;Ito A
• 通讯作者: Ito A

Seroprevalence and risk factors of human cysticercosis and taeniasis prevalence in a highly endemic area of epilepsy in Bangoua, west Cameroon

• DOI: 10.1016/j.actatropica.2015.12.019
• 发表时间: 2017-01-01
• 期刊: ACTA TROPICA
• 影响因子: 2.7
• 作者: Nkouawa, Agathe;Dschanou, Armel Romeo;Ito, Akira
• 通讯作者: Ito, Akira