权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Ｐ－ＢｏｄｙへのｓｉＲＮＡ送達を目指した細胞内ターゲティング高分子キャリアの構築

用于 siRNA 递送至 P-Body 的细胞内靶向聚合物载体的构建

基本信息

批准号：
14F04352
负责人：
宮田完二郎
金额：
$ 1.09万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-25 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14F04352/
关键词：
核酸医薬送達 siRNA P-Body ペプチドリガンド

项目摘要

核酸医薬として期待されるsmall interfering RNA (siRNA)は、細胞質にてargonaute 2 (Ago2)と呼ばれるタンパク質と複合体(RISC)を形成することで相補的なメッセンジャーRNAの分解を誘導する(RNA干渉)。一方、Ago2は細胞質においてP-bodyと呼ばれるフォーカスに集積していることが知られている。そこで本研究は、siRNAの細胞内動態を制御し、P-bodyへの集積量(もしくはRISC形成効率)を増加させることで、RNA干渉の効率を高めることが出来るのではないかと仮説を立て、研究を推進した。前年度までの検討を通じて、ペプチドリガンドを金ナノ粒子表層に導入することで、siRNAを効率良くがん細胞へと導入できることを確認した。本年度は、次なるステップとして、エンドサイトーシスを通じて細胞内に侵入した金ナノ粒子がエンドソームから細胞質へと効率良く移行するための方法論を検討した。具体的には、ヒドロキシクロロキンをエステル結合を介して金ナノ粒子表層に導入した。結果として、ヒドロキシクロロキン搭載金ナノ粒子は、ヒドロキシクロロキン未搭載のナノ粒子と比較して、効率の良いエンドソーム脱出およびRNA干渉を惹起した。これと並行して、siRNAのRISC形成効率に関しても評価したところ、ヒドロキシクロロキンの導入により有意に上昇していることが確認され、仮説に一致する結果となった。

Nucleic acid medicine is expected to be small interfering RNA (siRNA), cytoplasmic argonaute 2 (Ago2) The RISC complex (RISC) forms the RISC that complements the RNA decomposition and induces RNA interference (RNA interference). One party, Ago2はcytoplasmにおいてP-bodyとHUばれるフォーカスにassembleしていることが知られている.そこでThis studyは、siRNA intracellular dynamics controlし、P-body accumulation amount (RISC formation efficiency) The efficiency of RNA interference is high, the efficiency of RNA interference is high, the efficiency of RNA interference is high, and the efficiency of RNA interference is high. In the previous year, the introduction of the surface layer of the particles of the previous yearることで、siRNAをGood efficiencyくがんcellsへとIntroduction できることをconfirmationした. This year's なるステップとして, エンドサイトーシスを通じてに intrusion into the cells した金がエンドソームから Cytoplasm へと Good efficiency く Migration するための Methodology を検 Discussion した. Specifically, the には, ヒドロキシクロロキンをエステル combined with the をsuke して金ナノ particle surface layer に is introduced into the した. As a result, として and ヒドロキシクロロキン were equipped with gold nanoparticles, and ヒドロキシクロロキン was not equippedのナノ particles と comparison して, efficiency の good いエンドソーム ejaculation および RNA 干渉を provoke した.これとParallel して、siRNAのRISC formation efficiency に关してもreview価したところ、ヒドロキシクしていることがconfirmationされ、仮说に unanimousするRESULTとなった.