アブシジン酸による孔辺細胞細胞膜プロトンポンプの活性抑制に関与する蛋白質の解明

阐明脱落酸抑制保卫细胞膜质子泵活性所涉及的蛋白质

• 批准号: 14J05653
• 负责人: 堤 俊文
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-25 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J05653/
• 关键词: 気孔; 赤外線サーモグラフィ; 青色光

気孔は一対の孔辺細胞により構成され、環境に応じた開閉運動により、植物と大気間のガス交換を可能にする植物に必須の構造である。気孔開口における青色光シグナル伝達経路や細胞膜H+-ATPaseの活性制御機構について、多くの成分の存在が予測されるにもかかわらず同定には至っていない。上記の情報伝達に関わる新奇因子の同定を目的に、赤外線サーモグラフィによる葉面温度を指標に、青色光に依存した気孔開口が損なわれたシロイヌナズナ変異体の探索を行った。EMS変異体およびT-DNA挿入変異体を対象にスクリーニングを進め、青色光条件下において野生株と比較して葉温が低下しない変異体を多数単離した。次に、表皮および生葉における気孔開度を測定し、青色光に依存した気孔開口が損なわれた変異体18個体を選抜した。さらに、青色光に依存したH+-ATPaseの活性化を測定し、37-14A変異体と150-19F変異体を単離した。また、青色光情報伝達の初期過程を担うフォトトロピンとBLUS1の青色光に依存した自己リン酸化は正常であった。この結果から、37-14A変異体と150-19F変異体では、青色光情報伝達の初期過程は正常で、BLUS1から H+-ATPaseまでの間に変異が存在することが考えられる。この変異体に対して、現在、ゲノムマッピング解析およびシークエンス解析により原因遺伝子の絞り込みを行っている。これまでの解析の結果、37-14A変異体では第二染色体、150-19F変異体では第一染色体にそれぞれ変異が存在することがわかった。今後さらに絞り込み、候補遺伝子を同定した後、相補実験により変異体の原因遺伝子を確定する。次に、生化学的な解析により原因遺伝子の作用箇所を特定する。また、原因遺伝子のコードする蛋白質の性質を考慮し、蛋白質相互作用やリン酸化の解析を行い、その情報伝達機構の詳細を解明する。

Bore 気 は a の seaborne 辺 cells に よ り constitute さ れ, environmental に 応 じ た opening and closing movement に よ り, plant と between big 気 の ガ ス may exchange を に す に る plants must の tectonic で あ る. 気 hole opening に お け る cyan light シ グ ナ ル 伝 da 経 road や membrane H + - ATPase の active system of imperial institutions に つ い て, multiple く の composition exist の が be さ れ る に も か か わ ら ず with fixed に は to っ て い な い. Written の intelligence 伝 da に masato わ る novelty factor の with に を purpose, red outside サ ー モ グ ラ フ ィ に よ る leaf temperature に を index, cyan light に dependent し た 気 hole opening が loss な わ れ た シ ロ イ ヌ ナ ズ ナ - variant の exploration line を っ た. EMS - variant お よ び scions into - T - DNA variants を like に seaborne ス ク リ ー ニ ン グ を め, cyan light conditions に お い て wild strains と compare し て leaf temperature low が し な い - variant を most 単 from し た. に, epidermis お よ び leaf に お け る 気 hole opening を し, cyan light に dependent し た 気 hole opening が loss な わ れ た - 18 individual variants を choose sorting し た. さ ら に, cyan light に dependent し た H + ATPase の activeness を determination し, 37-14 - a variant と 150-19 f - variant を 単 from し た. ま た process early, cyan light intelligence 伝 の を bear う フ ォ ト ト ロ ピ ン と BLUS1 の cyan light に dependent し た himself リ ン acidification は normal で あ っ た. こ の results か ら, 37-14 - a variant と 150-19 f - variant で は, cyan light intelligence 伝 は normal で の initial process, BLUS1 か ら H + - ATPase ま で の に between variations exist different が す る こ と が exam え ら れ る. こ の - variant に し seaborne て, now, ゲ ノ ム マ ッ ピ ン グ parsing お よ び シ ー ク エ ン ス parsing に よ り reason but 伝 child の ground り 込 み を line っ て い る. こ れ ま で の analytical results の, 37-14 - a variant で は chromosome 2, 150-19 f - variant で は first chromosome に そ れ ぞ れ variations exist different が す る こ と が わ か っ た. Future さ ら に ground り 込 み, alternate but 伝 を with fixed し た and phase after be 験 に よ り - cause of allograft の survived 伝 を determine す る. The に and the な analysis of biochemistry によ the cause of によ the action of the 伝 particle is each を specific する. ま た, reason but 伝 の コ ー ド す る protein の nature を consider し や, protein interaction リ ン analytical を い, acidification の そ の intelligence 伝 of institutions の を explain in detail す る.

项目成果

青色光応答性の気孔開口を欠くシロイヌナズナ変異体の機能解析

缺乏蓝光响应气孔开放的拟南芥突变体的功能分析

• 发表时间: 2014
• 作者: Aosa Kamezaki;Fuminori Sato;Kazuya Tsumagari;Atsuko Sehara-Fujisawa;堤俊文
• 通讯作者: 堤俊文