Extraktion von Nukleinsäuren mit inversmizellaren Zweiphasensystemen

用胶束内两相系统提取核酸

• 批准号: 5433630
• 负责人: Dr. Carsten Voß
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Fermentationstechnik
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2003-12-31 至 2007-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5433630?language=en
• 关键词: Extraktion; von; Nukleins; uren; mit

Mikroemulsionen werden in der Bioverfahrenstechnik unter anderem in Form von inversmizellaren Zweiphasensystemen zur Extraktion von Biopolymeren eingesetzt. Zur Aufreinigung von Proteinen wurden solche Systeme bereits eingehend untersucht. Das Verhalten von Nukleinsäuren in solchen Systemen ist bislang nur stichprobenweise analysiert worden. Dies ist sicher damit zu begründen, dass Nukleinsäuren im Vergleich zu Proteinen bisher keine große Anwendung hatten. Durch die Verwendung von Plasmid-DNA als biopharmazeutischem Produkt hat sich diese Situation jedoch geändert. Plasmid-DNA kann als Genfähre für therapeutisch relevante Gene in der Gentherapie oder als Vehikel für kodierte Antigene in der genetischen Impfung verwendet werden. Im Vergleich zu herkömmlichen Therapeutika oder Vakzinen sind solche plasmidbasierten Wirkstoffe risikoärmer und leichter herzustellen. Im Rahmen des Forschungsvorhabens sollen inversmizellare Zweiphasensysteme untersucht werden, die eine selektive Aufreinigung der Plasmid-DNA erlauben. Bedingungen, die die Verteilung beeinflussen, sollen genau bestimmt werden, um einen Aufarbeitungsprozeß für dieses Produkt etablieren zu können. Zu diesem Zweck ist die Entwicklung eines hochparallelen Screeningverfahrens für Extraktionssysteme auf der Basis von Mikrotiterplatten von besonderer Bedeutung. Dies hat den Vorteil, dass unterschiedliche Extraktionsbedingungen schnell und unter minimalen Aufwand getestet werden können. Zunächst soll mit einfachen Modellsystemen, nämlich reiner Plasmid-DNA bzw. Plasmid-DNA in Kombination mit möglichen Kontaminanten wie RNA und Endotoxinen gearbeitet werden. Durch selektive Verteilung soll eine Abreicherung dieser Verunreinigungen erzielt werden. Durch Einbringen von Affinitätsträgern soll die Selektivität der Systeme gezielt verbessert werden. Abschließend soll die verfahrenstechnische Durchführung der getesteten Verfahren mit bakteriellem Klarlysat als wässriger Raffinatphase untersucht werden.

微乳液韦尔登在生物膜制备技术中的应用，以反相双相体系的形式从生物聚合物中提取。蛋白质的自由化将导致系统的崩溃。核反应堆在太阳能系统中的运行只能进行沃登。这是一个更好的开始，因为蛋白质的营养价值并不是很大的哈滕。但质粒DNA作为生物制药产品的应用使这种情况更加严重。质粒DNA可用于遗传治疗中的遗传治疗相关基因，或用于遗传学影响中的抗基因载体韦尔登。Im Vergleich zu herkömmlichen Therapeutika oder Vakzinen sind solche plasmidbasierten Wirkstoffe risikoärmer und leichter herzustellen.在双相逆转录酶系统的研究中，质粒DNA的选择性扩增被发现。Bedingungen，die Verteilung beeinflussen，sollen genau bestimmt韦尔登，um einen Aufarbeitungsprozeket für dieses Produkt etablieren zu können. Zu diesem Zweck ist die Entwicklung eines hochparallelen Screeningverfahrens für Extraktionssysteme auf der Basis von Mikrotiterplatten von besonderer Bedeutung.它是在涡流中进行的，它的最小限度的膨胀和最小限度的膨胀使韦尔登变得更小。Zunächst soll mit einfachen Modellsystemen，nämlich reiner Plasmid-DNA bzw.质粒DNA与RNA和内毒素混合韦尔登。选择性地将一个Abreicherung转换为一个韦尔登。系统的选择性是由系统自身的特性决定的，系统的特性是韦尔登的。Abschließend soll die verfaintech Durchführung der getesteten Verfahren mit bakteriellem Klarlysat als wässriger Raffinatphase untersucht韦尔登.