ＲＮＡ結合タンパク質が司る新規細胞周期制御メカニズム

由RNA结合蛋白控制的新型细胞周期控制机制

• 批准号: 15J05603
• 负责人: 野口 あや
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J05603/
• 关键词: RNA分解; RNA結合タンパク質; 細胞周期; DNA障害応答; リン酸化

昨年度までの研究により見出した複数のZFP36L2ターゲット候補mRNAについて、コントロール細胞とZFP36L2ノックダウン細胞における発現量を定量的PCRにより比較した。その結果、CCND3やCCNA2、CCNE2などのG1-SサイクリンをコードするmRNAがZFP36L2ノックダウン細胞で増加することを発見した。この結果から、ZFP36L2はG1-SサイクリンmRNAsの分解を誘導し、細胞周期進行を抑制する働きがあると考えられた。実際に、ZFP36L2ノックダウン細胞はDNA損傷時にS期停止する細胞の割合が減少しており、DNA修復時の細胞周期停止においてZFP36L2が重要な因子であることが明らかになった。また、ZFP36L2ノックダウン細胞は、DNA損傷時のアポトーシスの割合が高くなった 。この結果は、DNA損傷時にZFP36L2が細胞周期進行因子mRNAの分解を介して細胞周期を停止させ、アポトーシスを抑制している可能性を示す。さらに、質量分析の結果から、ZFP36L2が細胞周期の各phaseで異なる因子群と複合体を形成している可能性を見出した。ZFP36L2結合タンパク質の多くが核内タンパク質であったことから、ZFP36L2が核内機能を持つと考えられる。結合因子との相互作用を調べることで、これまで不明であったZFP36L2核移行の意義を明らかにすることができるかもしれない。本研究では、ZFP36L2がmRNA分解を介して細胞周期進行を抑制する新規細胞周期制御因子であることに加え、ZFP36L2がDNA損傷時の細胞の運命を決定する重要な因子であることを初めて明らかにした。また、細胞周期依存的な動的複合体形成や核内機能など、ZFP36L2の新たな知見を提供することができた。

通过对照细胞和ZFP36L2敲低细胞中的定量PCR比较了在去年研究中发现的多个ZFP36L2目标候选mRNA的表达水平。结果，我们发现在ZFP36L2敲低细胞中，增加了编码G1-S细胞周期蛋白（例如CCND3，CCNA2和CCNE2）的mRNA。从这些结果中可以认为，ZFP36L2诱导G1-S Cyclin mRNA的降解并抑制细胞周期的进展。实际上，ZFP36L2敲低细胞的细胞百分比降低，而在DNA损伤时阻碍了S相位，并且已经表明ZFP36L2是DNA修复过程中细胞周期停滞的重要因素。此外，ZFP36L2敲低细胞在DNA损伤后的凋亡率更高。该结果表明，ZFP36L2可能会通过在DNA损伤过程中通过细胞周期进程因子mRNA降解而阻止细胞周期，从而抑制细胞凋亡。此外，质谱法的结果表明，ZFP36L2可以在细胞周期的每个阶段形成不同因素的复合物。由于大多数ZFP36L2结合蛋白都是核蛋白，因此人们认为ZFP36L2具有核内功能。通过检查与结合因子的相互作用，可以阐明ZFP36L2核转运的先前未知的意义。在这项研究中，我们首次揭示了ZFP36L2是一种新型的细胞周期调节剂，可通过mRNA降解来抑制细胞周期的进展，而ZFP36L2是确定DNA损伤时细胞命运的重要因素。还可以提供有关ZFP36L2的新发现，包括细胞循环依赖性动态复合物和核功能。

项目成果

選択的mRNA分解を介したDNA障害応答

通过选择性 mRNA 降解产生 DNA 损伤反应

• 发表时间: 2016
• 作者: 菅野祐;松下恭子;佐々木亨;佐藤浩介;一戸悠人;野口あや
• 通讯作者: 野口あや

RNA結合タンパク質ZFP36L2の細胞周期制御における機能解析

RNA结合蛋白ZFP36L2在细胞周期调控中的功能分析

• 发表时间: 2015
• 作者: 菅野祐;松下恭子;佐々木亨;佐藤浩介;一戸悠人;野口あや;野口あや
• 通讯作者: 野口あや