転写因子による好塩基球の分化・機能制御についての研究

转录因子调控嗜碱性粒细胞分化和功能的研究

基本信息

批准号：
15J07928
负责人：
佐々木悠
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Yokohama City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-24 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J07928/
关键词：
単核貪食細胞 IRF8 エンハンサー慢性骨髄性白血病樹状細胞好塩基球

项目摘要

IRF8は樹状細胞（DC）、単球などの分化に必須の転写因子であり、IRF8による分化制御機構の破綻は慢性骨髄性白血病（CML）などの疾患に繋がる。我々はCMLの原因遺伝子（BCR-ABL）によってIRF8の発現が低下し、DCの分化が抑制されることを報告している。しかしながら、BCR-ABLによるIRF8抑制機構は未だに不明瞭である。また、定常状態におけるIRF8の発現量は分化段階によって緻密に制御されており、その発現量の違いが細胞の運命決定に重要と考えられる。我々は、転写開始点から離れた位置に存在し、転写を調節する領域（エンハンサー）に着目し、定常状態とBCR-ABL存在下におけるIRF8の発制御制機構について研究を行った。平成28年度までに、我々は培養細胞を用いてIrf8近傍に3つの活性化エンハンサー領域（E1、E2、E3）が存在することを明らかにした。平成29年度は、これらのエンハンサーが生体内においてどの分化段階で活性化するのかを検討した。IRF8はGMPにおいてわずかに発現しており、MDPへと分化が進む際に発現量が増加する。IRF8の発現はMDPがcMoPを経て単球へと分化する際には増加しないが、CDPを経てDCへと分化する際には発現が増加する。これらの細胞におけるエンハンサーについて調べた結果、E3は全ての前駆細胞で強く活性化し、DCでは弱い活性が見られること、E1は単核貪食細胞前駆細胞において強く活性化し、単球とGMPにおいては弱い活性が見られることが分かった。一方、E2はDCにおいてのみ活性化していた。従って、GMPにおいてE3がIrf8の発現を弱く誘導し、GMPから単核貪食細胞系へと分化が進む際にはE3とE1が協調して発現が増強、DCへと分化が進んだ際にはE2が、単球に分化が進んだ際にはE1がIrf8の発現を維持するのではないかと考えている。

IRF8是树突状细胞（DC），单核细胞的分化以及由IRF8引起的分化控制机制的失败导致疾病，例如慢性髓样白血病（CML）的疾病。我们报告CML致病基因（BCR-ABL）降低了IRF8表达并抑制DC分化。但是，BCR-ABL抑制IRF8的机制尚不清楚。此外，稳态中IRF8的表达水平由分化阶段精确控制，表达水平的差异被认为对于确定细胞的命运很重要。我们专注于远离转录起源并调节转录的区域（增强剂），并研究了IRF8在稳态和BCR-ABL存在下的机理。到2016年，我们透露，使用培养细胞，IRF8附近存在三个活化的增强子区域（E1，E2，E3）。 2017年，我们在分化的阶段进行了调查，这些增强剂在体内激活。 IRF8在GMP中略微表达，并且随着分化发展为MDP，表达水平增加。当MDP通过CMOP区分单核细胞时，IRF8的表达不会增加，但是当它通过CDP区分DC时，它会增加。我们研究了这些细胞中的增强子，发现E3在所有祖细胞中都强烈激活，DC的活性弱，并且在单核吞噬祖细胞中E1强烈激活，单核细胞和GMP的活性较弱。另一方面，仅在DC中激活E2。因此，我们认为E3会弱诱导GMP中的IRF8表达，并且当分化从GMP到单核吞噬细胞系的发展发展时，E3和E1会协同增加其表达，并且当分化发展到DC中时，E2可能在区分分化为单基因时保持IRF8表达时保持IRF8表达。