外生殖器におけるホルモン依存的性差構築機構の解明

阐明外生殖器官中激素依赖性性别差异的构建机制

• 批准号: 15J11033
• 负责人: 松下 祥子
• 金额: $ 1.39万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J11033/
• 关键词: 性差構築; アンドロゲン; 外生殖器

外生殖器性差構築とアンドロゲンの作用は古くから研究の対象とされてきたが、外生殖器においてはアンドロゲン受容体シグナルの標的遺伝子は同定されていなかった。本研究は、これまで未解明であったマウス外生殖器におけるホルモン依存的性差構築機構を分子レベルで解明することを目的としている。外生殖器における性差構築機構の分子基盤の全容を明らかにする為に、次世代シークエンサーを用いたChIP-seq解析を行った。本年度はE16.5の雌雄外生殖器を材料とし、抗ヒストン抗体を用いたChIP-seq解析を行った。この解析によりMafb遺伝子制御に関しては、昨年度報告したUTR上に存在するエンハンサーに加えて、外生殖器特異的な新規エンハンサーの存在が明らかになった。また、Mafb遺伝子の発現を正に制御する新規制御因子を同定した。更に、Mafb遺伝子以外の新規アンドロゲン標的因子、性差制御遺伝子が複数明らかになった。候補の中には転写因子があり、興味深い事に一部の癌細胞においても機能している事が従来報告されている。従って発生医学と癌細胞増殖制御をリンクする可能性が出てきている。これらの解析は発生医学、内分泌学、遺伝子制御学を横断する学際研究として、突出した成果が期待される。またマウス外生殖器におけるホルモン依存的性差構築機構を明らかにするために、外生殖器の器官培養系を確立した。またこの系は遺伝子導入も可能であり、既に先行実験を行っている。この系を用いることで、より詳細にかつ迅速に、外生殖器における遺伝子の機能解析や転写制御領域を含むコンストラクトを導入した発現制御解析することが可能となった。今後の更なる解析と合わせ、本研究はこれまで未解明であったマウス外生殖器におけるホルモン依存的性差構築機構の分子メカニズムの解明につながると考えられる。

长期以来，外源差异差异的构建和雄激素的作用一直是研究的主题，但是在外源器官中尚未鉴定出雄激素受体信号的靶基因。这项研究旨在阐明小鼠外源器官在分子水平上依赖激素依赖性性差异的机制。为了阐明外源器官中性别差异机理的完整分子基础，使用下一代序列仪进行了芯片序列分析。今年，使用E16.5肠源器官作为材料和使用抗固定抗体进行CHIP-SEQ分析。该分析揭示了除去年UTR报道的增强剂外，还存在新型的外源特异性增强剂。此外，还确定了一种积极调节MAFB基因表达的新型调节剂。此外，已经揭示了除MAFB基因以外的多个新型雄激素靶因子，并且已经揭示了几个性别差异的对照基因。候选者包括转录因子，以前已经报道它们在某些癌细胞中也起作用。因此，它有可能将发育医学与癌细胞增殖控制联系起来。预计这些分析将提供出色的结果，例如跨学科研究涵盖发展医学，内分泌学和基因监管科学。此外，为了阐明外源小鼠外源器官中激素依赖性的性别差构建机制，建立了外源器官的器官培养系统。该系统还允许基因转移，并且已经进行了事先实验。使用该系统，已经有可能分析外源器官中的基因功能，并通过引入包含转录控制区域的构建体来分析表达控制。随着未来的进一步分析，这项研究被认为会导致阐明小鼠外源器官中激素依赖性性别差异的分子机制，这些性器官到目前为止尚未阐明。

项目成果

Analysis of the Mafb gene expression during mouse external genitalia development

小鼠外生殖器发育过程中Mafb基因表达分析

• 发表时间: 2015
• 期刊: The Journal of Wakayama Medical Society
• 作者: Shoko Matsushita;Kentaro Suzuki;Gen Yamada
• 通讯作者: Gen Yamada

Systematic stereoscopic analyses for cloacal development: The origin of anorectal malformations.

• DOI: 10.1038/srep13943
• 发表时间: 2015-09-10
• 期刊: Scientific reports
• 影响因子: 4.6
• 作者: Matsumaru D;Murashima A;Fukushima J;Senda S;Matsushita S;Nakagata N;Miyajima M;Yamada G
• 通讯作者: Yamada G

尿道形成過程におけるMafb遺伝子性差発現制御機構の解明

阐明尿道形成过程中性别特异性Mafb基因表达的控制机制

• 发表时间: 2015
• 作者: 松下祥子;鈴木堅太郎;山田源
• 通讯作者: 山田源

尿道形成過程におけるアンドロゲンによる Mafb 遺伝子発現制御機構の解明.

阐明尿道形成过程中雄激素对 Mafb 基因表达的控制机制。

• 发表时间: 2016
• 期刊: 生殖内分泌学会雑誌
• 作者: 松下祥子;鈴木堅太郎;山田源
• 通讯作者: 山田源

Androgen regulates Mafb expression through its 3’UTR during mouse urethral masculinization

雄激素在小鼠尿道男性化过程中通过其 3UTR 调节 Mafb 表达

• DOI: 10.1210/en.2015-1586
• 发表时间: 2016
• 期刊: Endocrinology
• 影响因子: 4.8
• 作者: Matsushita S;Suzuki K;OginoY;Hino S;Sato T;Suyama M;Matsumoto T;Omori A;Inoue S;Yamada G
• 通讯作者: Yamada G