Optimierung molekularer Motoren mit Hilfe von gelenkter Evolution

使用引导进化优化分子马达

• 批准号: 5444425
• 负责人: Professor Dr. Georgios Tsiavaliaris
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Biophysikalische Chemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2004-12-31 至 2010-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5444425?language=en
• 关键词: Optimierung; molekularer; Motoren; mit; Hilfe

Wir werden im Rahmen dieses Forschungsvorhabens die Techniken der gelenkten Evolution einsetzen, um funktionelle, nur aus einer Polypeptidkette bestehende Myosine darzustellen. Ausgangspunkt unserer Arbeiten sind Myosinkonstrukte in denen die Nackenregion durch Spektrin-ähnliche Wiederholungseinheiten ersetzt wurde. Diese Konstrukte erzeugen in vitro Kraft und Bewegung gegen kleine Lasten, allerdings können sie das native Myosin nicht in der Zelle ersetzen. Durch die Kombination von "error-prone PCR", zur Veränderung der künstlichen Nackenregion, mit direkter Selektion für funktionelles Myosin in Dictyostelium, werden wir rekombinante Myosine erzeugen, die auch gegen höhere externe Kräfte Arbeit verrichten und natives Myosin in der Zelle ersetzen. Die Veränderungen der Nackenregion in diesen Konstrukten werden wir unter anderem Hilfe der Röntgenstrukturanalyse und von Einzelmolekülmessungen bestimmen. Die Ergebnisse dieser Untersuchungen werden wichtige Aufschlüsse über die mechanischen Eigenschaften Spektrin-ähnlicher Wiederholungseinheiten, die optimale Geometrie zur Übertragung von Kräften im Aktomyosin-System und die bestmögliche Verknüpfung zwischen Motor Domäne und künstlicher Nackenregion sowie Schwanzregion und künstlicher Nackenregion erbringen. Die erfolgreiche Durchführung dieses Projekts etabliert damit wichtige Grundlagen künstliche Motorproteine mit maßgeschneiderten Eigenschaften darzustellen.

我们韦尔登正在研究一种新的功能性进化技术，只不过是一种与肌氨酸有关的多肽。我们的劳动力在纳肯地区的军事结构中是由国防部长领导的。这些体外构建的Kraft和Bewegung在最近被发现，因为天然的肌球蛋白并不存在于细胞中。在“易错PCR”的组合中，为了验证Nackenregion的正确性，使用直接选择的方法对网骨细胞中的功能性肌球蛋白进行检测，韦尔登将检测到的肌球蛋白进行组合，也将检测到的外源性肌球蛋白和细胞中的天然肌球蛋白进行比较。Nackenregion的Veränderungen in diesen Konstrukten韦尔登wir unter anderem Hilfe der Röntgenstrukturanalysis und von Einzelmolekülmessungen bestimmen.该工程的韦尔登主要是由Eigenschaften Spektrin-ähnlicher Wiederholungseinheiten的机械结构、最佳几何结构和最佳的动力域和Nackenregion的最佳连接结构组成。Die erfolgreiche Durchführung dieses Projekts etabliert damit wichtige Grundlagen künstliche Motorproteine mit maßgeschneiderten Eigenschaften darzustellen.