組織球・樹状細胞系腫瘍モデル構築にもとづく疾患関連遺伝子の探索

基于组织细胞/树突状细胞肿瘤模型构建寻找疾病相关基因

• 批准号: 16J02129
• 负责人: 小林 真之
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-22 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J02129/
• 关键词: ランゲルハンス細胞組織球症; マウスモデル; ゲノム解析; cell free DNA; 樹状細胞

近年、ランゲルハンス細胞組織球症（LCH）に代表される組織球・樹状細胞系腫瘍について次世代シークエンサーを用いた網羅的ゲノム解析が試みられており、LCHでは過半数例でBRAF-V600Eを始めとしたMAPキナーゼ経路の遺伝子異常が報告されている。しかしながらLCHは生検困難な部位に好発し、また炎症性細胞浸潤が強く病変組織における腫瘍占拠率が低い等の理由から臨床検体を用いた病態解析は困難となっており、未だ発症に至る機序は解明されていない。本研究は、組織球・樹状細胞系腫瘍のヒト化疾患モデルマウスを樹立し、移植前の細胞集団や発症後の腫瘍を網羅的に解析することでBRAF-V600Eと協調して腫瘍化に働く候補遺伝子を見つけだすことを主目的としている。まず、前年度に臨床検体からの次世代シークエンス解析で同定したLCH発症に寄与する可能性が考えられたPIK3CD変異の評価を行った。同定した変異をクローニングして作成したレトロウイルスベクターを用いてBa/F3（マウスpro-B細胞）に導入し、野生型を導入した細胞と増殖速度や生存率を比較したがいずれも有意な差は確認できなかった。また形態学的にも有意な差を認めなかった。また、前年度作成したレトロウイルスベクターによって得たBRAF-V600EウイルスとFLuc-EGFPキメラ分子を発現するウイルスをヒト臍帯血由来CD34陽性細胞に共感染させ、in vitro／in vivoいずれにおいてもモニター可能となるよう標識した。この感染細胞を短期間GM-CSFとSCFで刺激したのちNOGマウスへ移植した。移植からおよそ一ヶ月後の段階では腫瘍発症は確認できていない。今後も引き続きマウスの観察を継続するとともに、発症に至らない場合は条件検討を重ねていきたい。

In recent years, LCH has been reported as a representative of the development of cell spheres and dendritic cell line tumors in the next generation. LCH has been reported as a result of more than half of BRAF-V600E and MAP. The reason why the percentage of tumor is low is that the disease is difficult to analyze and the mechanism is clear. This study aims to analyze the development of tumor cells in dendritic cell lines before and after transplantation, and to coordinate the development of tumor cells in dendritic cell lines. In the past year, the number of clinical cases and the number of cases in the next generation have been analyzed. In the same way, the difference in cell proliferation rate and survival rate between wild type and introduced Ba/F3 cells was confirmed. Morphological differences are intentional. The BRAF-V600E molecule was developed in the previous year by co-infection of CD34 positive cells in umbilical blood, in vitro/in vivo, and possibly in vivo. GM-CSF and SCF stimulate the growth of infected cells. A month after the transplant, the patient's symptoms were confirmed. In the future, we will discuss the conditions of the disease.

项目成果

Personalized ctDNA dynamically predict treatment response and relapse in hematological malignancies.

个性化 ctDNA 动态预测血液恶性肿瘤的治疗反应和复发。

• 发表时间: 2017
• 作者: Sousuke Nakamura;Kazuaki Yokoyama;Nozomi Yusa;Asako Kobayashi;Mika Ito;Masayuki Kobayashi;et al
• 通讯作者: et al

Cancer progression by reprogrammed BCAA metabolism in myeloid leukaemia.

• DOI: 10.1038/nature22314
• 发表时间: 2017-05-25
• 期刊: Nature
• 影响因子: 64.8
• 作者: Hattori A;Tsunoda M;Konuma T;Kobayashi M;Nagy T;Glushka J;Tayyari F;McSkimming D;Kannan N;Tojo A;Edison AS;Ito T
• 通讯作者: Ito T

Personalized Circulating Tumor DNA Predicts Relapse after Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation in Acute Myeloid Leukemia and Myelodysplastic Syndrome.

个性化循环肿瘤 DNA 可预测急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征异基因造血干细胞移植后的复发。

• 发表时间: 2017
• 作者: Sousuke Nakamura;Kazuaki Yokoyama;Nozomi Yusa;Miho Ogawa;Tomomi Takei;Asako Kobayashi;Mika Ito;Masayuki Kobayashi;et al
• 通讯作者: et al

Clinical profile and BRAF status of adult Langerhans cell histiocytosis in a single institution

单一机构成人朗格汉斯细胞组织细胞增多症的临床概况和 BRAF 状态

• 发表时间: 2016
• 作者: Miyamae;R. & Atsumi;T;小川弥穂・小林真之・竹田玲奈・越智清純・武井智美・川俣豊隆・横山和明・大野伸広・高橋聡・内丸薫・東條有伸
• 通讯作者: 小川弥穂・小林真之・竹田玲奈・越智清純・武井智美・川俣豊隆・横山和明・大野伸広・高橋聡・内丸薫・東條有伸

NEEDS ASSESSMENT OF HISTIOCYTOSIS PHYSICIANS IN ASIA AND THE MIDDLE EAST: RESULTS OF AN "AME- HISTIO NETWORK" QUESTIONNAIRE.

亚洲和中东组织细胞增多症医生的需求评估：“AME-Histio 网络”调查问卷的结果。

• 发表时间: 2017
• 作者: Roula Farah;Ahmed Naqvi,Zhao Wang;Wenyuan Lai;Rsumi Dalu;Jia Zhang;Muhammad Ashraf;Iris Kventsil;Jing Cao;Yunze Zhao;Dong Urang;Shaheen Shamji;Akira Morimato;Faisal Al Anzi;Michael Weintraub;Xiaodong Shi;Arinobu Tojo;Masayuki Kobayashi;et
• 通讯作者: et