乳酸菌ＤＮＡナノカプセルを用いた経口アジュバントの創製研究

本研究では、乳酸菌由来オリゴDNA（MsST）をカルシウム性ナノ粒子に包摂（MsSTcap）し、経口アジュバントの創製研究を実施した。まずMsSTcapを経口投与したマウスの脾臓を用いてゲノミクス解析を行った。C57BL/6 （4週齢, 雌）マウスを無処理（NT）群、MsSTを含まないカプセル（cap）投与群、MsSTcap投与群の3群に分け、6週齢からcapあるいはMsSTcap 1mgをそれぞれ含むPBS 200μLを28日間連続経口投与した。最終投与4時間後にマウスを安楽死させ、脾臓をマイクロアレイ解析に供した。NT群およびcap投与群と比較して、MsSTcap投与群では炎症誘導や好中球遊走に関連するCxcl5がそれぞれ4.02倍、3.46倍増加した。NT群と比較して、MsSTcap投与群ではIgA産生に関連する腸管免疫ネットワーク因子であるtnfrsf17が2.09倍増加した。次に当初予定したコレラ毒素（CT）を用いた致死モデルにおけるMsSTcapのアジュバント活性については、CTサブユニットBを産生する組換え大腸菌を得られなかったため、食中毒の原因となるSalmonella菌の構成成分リポ多糖（LPS）を抗原として、MsSTcapのアジュバント活性について検証した。C57BL/6（4週齢, 雌）マウスを予備飼育後、5, 6および7週齢時にcapあるいはMsSTcap 1mg、LPS 10μgをそれぞれ含むPBS 200μLを経口投与した。9週齢でマウスを安楽死させ、糞便におけるLPS特異的IgA産生量をELISA法により解析した。NT群と比較してLPS投与群でLPS特異的IgA産生量が増加したが、LPS投与群とMsSTcap+LPS投与群との間に差は認められなかった。またオリゴDNAの一つであるODN1585が敗血症の重篤化を抑制することを明らかにした。

本研究では、乳酸菌由来オリゴDNA（MsST）をカルシウム性ナノ粒子に包摂（MsSTcap）し、経口アジュバントの創製研究を実施した。まずMsSTcapを経口投与したマウスの脾臓を用いてゲノミクス解析を行った。C57BL/6 （4週齢, 雌）マウスを無処理（NT）群、MsSTを含まないカプセル（cap）投与群、MsSTcap投与群の3群に分け、6週齢からcapあるいはMsSTcap 1mgをそれぞれ含むPBS 200μLを28日間連続経口投与した。最終投与4時間後にマウスを安楽死させ、脾臓をマイクロアレイ解析に供した。NT群およびcap投与群と比較して、MsSTcap投与群では炎症誘導や好中球遊走に関連するCxcl5がそれぞれ4.02倍、3.46倍増加した。NT群と比較して、MsSTcap投与群ではIgA産生に関連する腸管免疫ネットワーク因子であるtnfrsf17が2.09倍増加した。次に当初予定したコレラ毒素（CT）を用いた致死モデルにおけるMsSTcapのアジュバント活性については、CTサブユニットBを産生する組換え大腸菌を得られなかったため、食中毒の原因となるSalmonella菌の構成成分リポ多糖（LPS）を抗原として、MsSTcapのアジュバント活性について検証した。C57BL/6（4週齢, 雌）マウスを予備飼育後、5, 6および7週齢時にcapあるいはMsSTcap 1mg、LPS 10μgをそれぞれ含むPBS 200μLを経口投与した。9週齢でマウスを安楽死させ、糞便におけるLPS特異的IgA産生量をELISA法により解析した。NT群と比較してLPS投与群でLPS特異的IgA産生量が増加したが、LPS投与群とMsSTcap+LPS投与群との間に差は認められなかった。またオリゴDNAの一つであるODN1585が敗血症の重篤化を抑制することを明らかにした。