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分裂期キナーゼＡｕｒｏｒａ　Ｂの活性制御の破綻による染色体不安定性獲得機構の解明

阐明有丝分裂激酶 Aurora B 活性控制破坏导致染色体不稳定的机制

基本信息

批准号：
16J03050
负责人：
迫洸佑
金额：
$ 2.08万
依托单位：
Japanese Foundation for Cancer Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-22 至 2019-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J03050/
关键词：
染色体分配 CPC HP1 INCENP Aurora B IDR

项目摘要

正確な染色体分配を担う重要な分子として、染色体パッセンジャー複合体(CPC)が知られている。CPCはM期キナーゼであるAurora Bを含み、INCENP(足場タンパク)、Survivin, Borealinの4つのタンパク質から成る複合体である。また、INCENPにはHP1が結合することも知られていたが、その生理的意義は長らく不明であった。近年我々は、HP1結合がCPCの正常な活性維持に必須であることを示した[Abe et al., 2016]。加えて、Aurora BキナーゼによるHP1へのリン酸化が、HP1のCPCに対する安定的な結合を保障していることも明らかとなり、HP1/CPC相互作用における正のフィードバックループ機構の存在が示唆されていた。そこで本研究員は、HP1によるCPC活性制御機構の解明を目標に掲げて研究を遂行した。その際、HP1が結合するINCENPの天然変性領域(IDR)に着目して構造生物学的な観点からその解析を進めることにした。まず本年は、前年のNMR解析から明らかとなったHP1/INCENP結合新規領域中における、相互作用に必須のアミノ酸残基を特定した。このアミノ酸残基は従来の結合モチーフと同程度に重要である事も判明し、HP1の既知の結合様式とは一線を画す新たな結合様式の存在が示唆された。加えて、前年のHigh-Speed AFM解析からHP1結合に伴ってINCENPのIDRがより伸長傾向になることが判明していた。このことから本年は、培養細胞の実験系においてCPCを強制的に屈曲させる機構を開発すべく、ラパマイシンを介したFKBP/FRBのヘテロダイマー形成能力を利用し、FKBP/FRB 付加INCENP変異体恒常発現株を樹立した。今後は、ラパマイシン添加によってINCENPの伸長を阻害した際の表現型解析を行う予定である。

Correct chromosome allocation is important for the molecular structure and chromosome structure complex (CPC). CPC はM phase キナーゼであるAurora Bをみ, INCENP (foot field タンパク), Survivin, Borealin の4つのタンパクquality から成る Complex である.また, INCENP にはHP1がcombination することも知られていたが, そのphysiological significance は长らく无码であった. In recent years, it has been shown that HP1 combined with CPC is necessary to maintain normal activity [Abe et al., 2016]. Kato, Aurora BキナーゼによるHP1へのリンacidifiedが, HP1のCPCに対するstable bonding guaranteeしていることも明らかとなり、HP1/CPC interaction における正のフィードバックループMechanism の出款されていた. This researcher has clarified the target of HP1's CPC activity control mechanism and carried out the research. It is based on the analysis and analysis of the structural biology of the Integrated Integrated Research and Development Area (IDR) of INCENP and HP1. The NMR analysis of this year and the year before last was based on the HP1/INCENP combined with the new regulation field and the specific interaction of the acid residues required in the new regulation field. The same degree of conjugation of the このアミノ acid residues as the は従来の is important, and it has been clarified that HP1's already known 様style and とは线を画す新たなcombine様style's existence がshows instigation and された. The high-speed AFM analysis of the year before last and the analysis of the HP1 combined with the INCENP's IDR and the elongation tendency of the two years ago revealed that it was clear.このことからThis year, the cultured cell system においてCPCをforced にflexion させるMechanismを开発すべくFKBP/FRB The INCENP variant is added to the constant growth of the strain. From now on, we will add the によってINCENPのelongation and hindrance to the phenotypic analysis of the ラパマイシン.