低悪性度神経膠腫の術中迅速可視化を実現する蛍光プローブの開発と機能検証

用于低级别胶质瘤术中快速可视化的荧光探针的开发和功能验证

• 批准号: 16J05981
• 负责人: 山本 恭子
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-22 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J05981/
• 关键词: 蛍光プローブ; がんイメージング; PSMA; 脳腫瘍; プロテアーゼ; グルコーストランスポーター; イソクエン酸デヒドロゲナーゼ１

腫瘍選択的な蛍光イメージングを実現するための戦略として、腫瘍細胞において発現や活性が亢進していることが知られているプロテアーゼを利用する手法が挙げられる。今年度は、前立腺がん細胞や乳がん・脳腫瘍などの新生血管において高発現することが報告されているProstate specific membrane antigen (PSMA)を標的とした、がんイメージングプローブ開発を行った。PSMAはペプチドC末端のグルタミン酸を切断するカルボキシペプチダーゼとして働くことから、当研究室ではその活性を検出するactivatable型蛍光プローブとして5GluAF-Fluoresceinを開発していた。5GluAF-Fluoresceinは、分子内のアゾホルミル基の強い電子求引性により光誘起電子移動(PeT)が起こり消光しているが、PSMAによりグルタミン酸が切断されると強蛍光性のフルオレセインが放出される設計となっている。しかし、フルオレセインは水溶性が高く、細胞膜を透過しないことが課題として挙げられていた。そこで、私は色素骨格の変更により、細胞膜透過型のPSMA活性検出プローブの開発に取り組んだ。具体的には、色素骨格をより脂溶性の高い構造へ変換したプローブを3種類設計・合成し、PSMA精製酵素や前立腺がん由来細胞を用いて反応速度や細胞膜透過性の評価を行った。その結果、2Me-TokyoGreen (2MeTG)を骨格とする5GluAF-2MeTGはPSMAに対して最も速い応答を示し、かつPSMA発現細胞の細胞内を蛍光染色することが可能であることが示された。また、5GluAF-2MeTGを用いてヒト前立腺がん手術検体のイメージングを行ったところ、蛍光を示す部位とPSMAを発現するがん部位とが概ね一致し、世界で初めて前立腺がん臨床検体内のがん部位のライブイメージングに成功した。

The selected light is displayed, the cell is active, the activity is increased, and the activity is not known. In this year's primary and secondary glands, the breast cancer cells were killed and the neovascularization was detected. This year, the breast cancer Prostate specific membrane antigen (PSMA) was reported to be successful. In the PSMA system, the C-terminal device was used in the laboratory, which was used in the laboratory to activate the 5GluAF-Fluorescein system. 5GluAF-Fluorescein, intramolecular optical emission, optical emission, emission, emission and emission. 5GluAF-Fluorescein, intramolecular The water solubility is very high, and the cell membrane is high in water solubility. in this way, the water solubility is high and the cell membrane is high. The activity of cell membrane permeable PSMA was detected by enzyme linked immunosorbent assay (Elisa), and the activity of cell membrane permeable DNA was detected. The specific enzyme, the pigment bone, the fat-soluble, the fat-soluble, the synthetic, the PSMA, the prostatic gland, the prostatic gland, the cell, the cell, the cell membrane permeability, the cell cycle, the cell membrane permeability, and the cell membrane permeability. The results showed that 2Me-TokyoGreen (2MeTG) bone cell 5GluAF-2MeTG PSMA cell showed the fastest response, and PSMA showed that the cells were stained with light and the cells were stained with light. For the first time in the world, the parts of the anterior standing gland, the body parts of the body, the parts of the body, the parts

项目成果

アビジン-蛍光プローブ複合体を用いた高感度がんイメージング

使用抗生物素蛋白-荧光探针复合物进行高灵敏度癌症成像

• 发表时间: 2016
• 作者: Kyoko Yamamoto;Mako Kamiya;Yasuteru Urano;山本恭子，神谷真子，浦野泰照
• 通讯作者: 山本恭子，神谷真子，浦野泰照

Highly Sensitive Cancer Imaging with Avidin-Fluorescence Probe Conjugate

使用亲和素-荧光探针结合物进行高灵敏度癌症成像

• 发表时间: 2016
• 作者: Kyoko Yamamoto;Mako Kamiya;Yasuteru Urano
• 通讯作者: Yasuteru Urano

カルボキシペプチダーゼ活性検出用蛍光プローブ

检测羧肽酶活性的荧光探针

• 发表时间: 2019

PSMA活性検出プローブによる前立腺がん蛍光イメージング

使用 PSMA 活性检测探针进行前列腺癌荧光成像

• 发表时间: 2019
• 作者: 山本恭子;河谷稔;山田大介;森川鉄平;神谷真子;久米春喜;浦野泰照
• 通讯作者: 浦野泰照

アビジン-蛍光プローブ複合体による高感度がんイメージング

使用抗生物素蛋白-荧光探针复合物进行高灵敏度癌症成像

• 发表时间: 2017
• 作者: 山本恭子;河谷稔;山田大介;森川鉄平;神谷真子;久米春喜;浦野泰照;山本恭子，神谷真子，浦野泰照
• 通讯作者: 山本恭子，神谷真子，浦野泰照