ＲＮａｕｔｏｐｈａｇｙの細胞内基質の同定およびその生理的意義の解明

RNA自噬细胞内底物的鉴定及其生理意义的阐明

• 批准号: 17J09158
• 负责人: 株田 千華
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-26 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17J09158/
• 关键词: RNautophagy; RNA分解; SIDT2

新規オートファジシステムーRNautophagyは、リソソームにATP依存的にRNAを直接取り込み分解する機構である。これまで、単離リソソーム系を用いてRNautophagyによるリソソームへのRNAの取り込み機序について調べられてきたが、実際の生体内においてRNautophagyの細胞内基質となるRNAはまだ明らかになっていない。また、動物個体におけるRNautophagyの生理的意義も不明である。そこで、本研究では、(1)RNautophagyにおける細胞内基質の同定、(2)動物個体における定常的RNautophagyの生理的意義解明、を目的として研究をすすめている。本年度は、どのようなRNAがRNautophagyの基質になりうるかについて、Actinomycin D、[3H]-ウリジンによる新生RNA標識、Tet-offヘベクターを用いた発現制御システムなど複数の系を用いて検討した。RNautophagyにおいて輸送体として機能するSIDT2をノックダウン、または過剰発現させた細胞を用いて、前述した種々の方法によりRNA分解のチェイスを行った。その結果、複数種類のRNAにおいて、SIDT2の発現変化に伴うRNA分解の変化がみられた。更に、Actinomycin Dを用いた系を用いてマイクロアレイを行い、主にmRNAの分解について網羅的な解析を行い、現在詳細な解析をすすめる段階に入っている。また、SIDT2ノックアウトマウスにおいても、RNA蓄積や筋変性などの症状が観察された。研究成果の報告としては、得られた結果の一部をとりまとめ、RNautophagyの細胞内基質になりうるRNAついて学会発表を行うことができた。

New rules オ ー ト フ ァ ジ シ ス テ ム ー RNautophagy は, リ ソ ソ ー ム に に of ATP dependent RNA を directly take り 込 み decomposition す る institutions で あ る. こ れ ま で, 単 リ ソ ソ ー を ム department with い て RNautophagy に よ る リ ソ ソ ー ム へ の RNA の take り 込 み machine sequence に つ い て adjustable べ ら れ て き た が in the event, be born の に お い て RNautophagy の cell matrix と な る RNA は ま だ Ming ら か に な っ て い な い. Youdaoplaceholder0, individual animal における the physiological significance of RNautophagy また unknown である. そ こ で, this study で は, (1) RNautophagy に お け る の matrix with fixed in the cell, (2) the individual animals に お け る constant of RNautophagy の physiological meaning uttered, を purpose と し て research を す す め て い る. は this year, the ど の よ う な RNA が RNautophagy の matrix に な り う る か に つ い て, Actinomycin D, [3 h] - ウ リ ジ ン に よ る RNA identification, Tet - off new ヘ ベ ク タ ー を with い た 発 now suppression シ ス テ ム な ど plural の is を with い て beg し 検 た. RNautophagy に お い て conveying body と し て function す る SIDT2 を ノ ッ ク ダ ウ ン, ま た は before turning 発 now さ せ た cells を using い て, the foregoing し た kind 々 の way に よ り RNA decomposition の チ ェ イ ス を line っ た. Youdaoplaceholder0 <s:1> results, multiple types of <s:1> RNAにお て て て, SIDT2 <s:1> evolution に accompanied by うRNA decomposition evolution がみられた. More に, Actinomycin D を い を た department with い て マ イ ク ロ ア レ イ を い, Lord に mRNA の decomposition に つ い て snare of な を い, detailed な now parse を す す め る Duan Jie に into っ て い る. ま た, SIDT2 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス に お い て も, RNA accumulation や jin - な ど の symptoms が 観 examine さ れ た. Research report の と し て は, ら れ た results の a を と り ま と め, RNautophagy の cell matrix に な り う る RNA つ い て learn 発 table line を う こ と が で き た.

项目成果

Multiple mRNAs are degraded by SIDT2-mediated RNautophagy in cells.

细胞中多种 mRNA 被 SIDT2 介导的 RN 自噬降解。

• 发表时间: 2017
• 作者: Takahashi M;Contu VR;Kabuta C;Hase K;Fujiwara Y;Wada K;Kabuta T;Chihana Kabuta
• 通讯作者: Chihana Kabuta

Lysosomal targeting of SIDT2 via multiple YxxΦ motifs is required for SIDT2 function in the process of RNautophagy

• DOI: 10.1242/jcs.202481
• 发表时间: 2017-09-01
• 期刊: JOURNAL OF CELL SCIENCE
• 影响因子: 4
• 作者: Contu, Viorica Raluca;Hase, Katsunori;Kabuta, Tomohiro
• 通讯作者: Kabuta, Tomohiro