RNA分解産物をリサイクルするリガーゼリボザイムの創出

创建可回收 RNA 降解产物的连接酶核酶

• 批准号: 22K19118
• 负责人: 加藤 義雄
• 金额: $ 3.99万
• 依托单位: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19118/
• 关键词: RNA; 進化分子工学; リガーゼ; リボザイム

RNAワールド仮説では、前生物的な地球環境において、簡単な有機分子群が縮合を繰り返しながら大きな分子種へと変換され、モノマーヌクレオチドが大量に存在し得たという前提に端を発する。現代生物は、リボヌクレオチド三リン酸（NTP）を利用してポリマー化することにより、RNAを生合成している。NTPを基質として利用しポリマー化を促進する反応が、RNA自身によって触媒されるとするならば、自己複製可能なRNAが誕生できるのではないか、というのがNTP型仮説である。実際2001年に、NTPを連続的に縮合していく反応を触媒できるような酵素が人工進化によって作成されてきたことで、このNTP型仮説の実証が近づいてきた。しかし、前生物的環境において大量に存在し得たRNAモノマーはNTP型ではなく環状リン酸型ヌクレオチドである蓋然性が高いとの推測にもとづき、環状リン酸型のRNAポリメラーゼが存在し得たのではないかと仮説を立てた。この環状リン酸型仮説が成立しうるとすると、環状リン酸型ポリメラーゼ以前に環状リン酸型リガーゼリボザイムが出現し得たと推察される。そこで本研究では進化工学により、環状リン酸型リガーゼリボザイムの取得を試みる。初年度は、3’末端に環状リン酸を有する基質RNAと、5'末端にヒドロキシ基を有するリボザイムRNAを、安定的に調製供給する手法として、いくつかの手法論を検討した。また、初期配列としては微弱なリガーゼ活性を有する既知配列をスキャフォールドとして採用し、変異を導入しながらその効率を向上させる方針で、設計を進めている。

RNA, the global environment of the former organisms, the organic molecular groups of the former organisms, and the molecular groups of the former organisms are known to exist in large quantities on the premise that they exist in large quantities. The generation of organisms, the synthesis of trimeric acid (NTP), the synthesis of trichloroacid (NTP) and the synthesis of triglyceride (Trichosanthin). NTP is used to promote anti-virus, RNA itself, catalyst, copy, copy, In the 2001's, the NTP link was used to reverse the reaction of the catalyst. the enzyme was artificially modified to make a real-time response, and the NTP type was used to reduce the temperature. There are a large number of environmental accidents in the environment of pre-living organisms and pre-biologics. there are a large number of environmental diseases, such as RNA, pre-biological environment, environment and environment. The environmental acid type has been established, and the environmental acid type has been found to be successful in the past. In the course of this study, we have obtained the results of chemical engineering and environmental education. At the beginning of the year and at the end of the year, there is an RNA in the end of the year, a RNA in the end of the 5', a stable supply of the device in the beginning and the end of the year, and a safe supply to the device. In the early stage, the performance of the equipment is very weak. The activity of the equipment is that it is known that the equipment is used, the input rate is higher, and the design is improved.