Herstellung von RNAi-Zelllinien zur funktionellen Analyse von Phosphoinositiden bei der Bildung, Transport und Regulation von Membran-Microdomänen, Lipiden und Proteinen (Z 01)

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Im beantragten Projekt soll auf zellulärer und molekulare Ebene geprüft werden, inwieweit das Ausschalteneinzelner Phosphoinositide (PIPs) die Zusammensetzung der übrigen Membranlipide, dieBildung bzw. Zusammensetzung von Rafts und Phosphatidylinositid enthaltenden Mikrodomänen unddie Funktion, Transport und Lokalisation einzelner integraler Membranproteine beeinflusst. Es istbekannt, dass PIPs die Aktinpolymerisation stimulieren und die Bildung von fokalen Zytoskelett-Plasmamembran Verbindungen beeinflussen. Daher soll durch die gezielte Ausschaltung der PIPsuntersucht werden, inwiefern Zytoskelettproteine eine Anreicherung von PIPs in den Lipid Rafts stimulierenund die Membran verändern. Dabei soll die Herstellung der knock-out Modelle mit Hilfeneuartiger Methoden basierend auf der RNA Interferenz Technologie erfolgen.