ウシ胚盤胞期胚分化において割球の位置関係が果たす役割

卵裂球位置在牛囊胚期胚胎分化中的作用

• 批准号: 17J03585
• 负责人: 郡 七海
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-26 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17J03585/
• 关键词: 胚盤胞期; ウシ初期胚

哺乳類の初期胚では胚盤胞形成時に胞胚腔という腔所を形成し、将来、主に胎子を形成する内部細胞塊 (Inner cell mass; ICM) および胎盤を形成する栄養外胚葉 (Trophectoderm; TE) への分化が起こる。この分化モデルの一例として、胚の立体構造の上で内側に位置する割球がICMに、外側に位置する割球がTEに分化するという内外モデルが提唱されている。さらに、このモデルの分子的メカニズムとしてHippoシグナルの関与が考えられている。本研究の目的は、ウシ胚盤胞期胚における単離ICMを培養することで胚の立体構造における内外の位置関係を人為的に変化させ、TEを再生するかどうか、およびその分子メカニズムとしてHippoシグナルが関与するかどうかを検討することである。Hippoシグナル構成因子であるYAPおよびTEAD4は下流遺伝子の転写を制御するために複合体を形成する必要があると言われており、これらのタンパク質が相互作用しているかどうかを調べるため免疫沈降を行った。その結果、ウシ線維芽細胞においてYAPおよびTEAD4の相互作用を検出した。次に、単離ICMをHippoシグナル上流のRho阻害剤C3 transferase添加培地で培養するとYAP核内移行が抑制され、TEマーカーであるCDX2陽性細胞数が減少した。この結果から、24時間培養ICMにおいてYAPがCDX2の発現を制御していると考えられた。さらに、24時間培養ICMにおけるICMマーカーの発現および局在を調べるために、SOX17の免疫染色を行った。その結果、単離ICMと24時間培養ICMでSOX17の発現および局在に変化は認められなかった。しかし、初期胚発生中におけるSOX17の発現動態はマウスと異なっており、ウシとマウスでICMの分化制御機構に違いがある可能性が示唆された。

In the early stage of mammals, the blastoderm cells are formed, the blastocoel is formed, and in the future, the fetus is formed, the inner cell mass (ICM) is formed, the placenta is formed, and the trophectoderm (TE) is formed.へのdifferentiationが起こる. An example of differentiation of the embryoに、The position of the outside is the same as cutting the ball and the TE is divided into the inside and outside.さらに, このモデルのmolecule's メカニズムとしてHippoシグナルの关 and が卡えられている. The purpose of this study is to focus on the three-dimensional structure of the blastoderm stage embryo, the three-dimensional structure of the embryo, the positional relationship between the inside and outside, and the artificial transformation of the blastoderm stage embryo.せ、TEを生するかどうか、およびそのmolecule メカニズムとしてHippo シグナルが关与するかどうかを検question することである. Hippo シグナルConstituting factor であるYAP およびTEAD4はIndecent legacy 伝子の転WRITE をcontrol するために Complex を Formation すIt's necessary to tell the story The interaction is the same as the immune sedimentation.そのRESULTS, ウシLINED BUD CELL においてYAP およびTEAD4の INTERACTION を検出した. Isolated ICM has inhibited upstream Rho C3 transferase and cultured by adding Pedi, inhibited YAP intranuclear migration, and reduced the number of CDX2-positive cells in TE.このRESULTSから、24-hour cultivation of ICMにおいてYAPがCDX2の発appearsをcontrolしているとtestえられた.さらに, 24-hour culture of ICM におけるICM マーカーの発行およびbureau in をadjusted べるために, SOX17 のimmunostaining を行った.そのResults, single ICMと24 time cultivation ICMでSOX17の発成およびbureau in に変化は recognized められなかった.しかし、Initial embryonic development におけるSOX17の発appears dynamic はマウスとdifferent なっており, ウシとマウスでICMのdifferentiation control mechanism にviolation いがある possibility が indication instigation された.