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生殖中枢を制御するエストロゲンの正負フィードバックを担う分子メカニズムの解明

阐明控制生殖中枢的雌激素正负反馈的分子机制

基本信息

批准号：
17J05577
负责人：
堀畑慶
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-04-26 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、生殖中枢を制御するエストロゲン（E2）の正負フィードバックを担う分子メカニズムの解明である。哺乳類の生殖中枢であるキスペプチンニューロンに着目し、E2によるキスぺプチン遺伝子（Kiss1）発現及びキスペプチン分泌制御における分子メカニズムを解明するため、昨年度は以下の実験を遂行した。①Kiss1発現制御候補因子の機能解析E2有無条件下のマウス弓状核由来のキスペプチンニューロン不死化細胞株（mHypoA-55株）において、ヒストン修飾関連タンパク質retinoblastoma-binding protein 7（Rbbp7）遺伝子に対するsiRNAを導入し、Rbbp7ノックダウンを行い、Kiss1発現への影響をRT-qPCR法により検討した。その結果、Rbbp7ノックダウンにより、Kiss1 発現が有意に減少した。このとき、siRNAによりRbbp7遺伝子発現及びRBBP7タンパク質発現は有意に減少していた。Kiss1及びRbbp7いずれの発現においても、E2の有無による変化は認められなかった。以上から、RBBP7がE2非依存的に、キスペプチンニューロンにおけるKiss1発現のupregulationを仲介する可能性が示唆された。②キスペプチン分泌制御因子の探索及び機能解析キスペプチン分泌におけるエストロゲンの負のフィードバックメカニズムに、synaptosomal nerve-associated protein 25（SNAP-25）の発現が関与するという仮説のもと、 mHypoA-55株にE2を添加し、Snap25 遺伝子発現を RT-qPCR 法により検討した結果、E2によってSnap25 遺伝子発現が有意に増加した。よって、弓状核キスペプチンニューロンにおいてSNAP-25がE2による制御を受け、何らかの分泌を制御していると考えられた。

The purpose of this study is to clarify the negative number of the reproductive center (E2). Mammalian reproductive center, E2, E3, E4, E5, E6, E7, E7, E8, E8, E9, E (1) Functional analysis of Kiss1 expression candidate factors in E2 under the presence or absence of conditions related to the origin of the arcuate nucleus and the expression of Kiss1 gene by RT-qPCR. The results, Rbbp7, Kiss1, were intentionally reduced. The expression of Rbbp7 gene and Rbbp7 gene was intentionally reduced by siRNA. Kiss1 and Rbbp7 are displayed in the middle of the screen, E2 is displayed in the middle of the screen, and the screen is displayed in the middle of the screen. The possibility of Kiss1 occurrence upregulation is shown above for RBBP7 and E2 independent. 2. Exploration and functional analysis of the factors controlling the secretion of cytosine, the development of synaptosomal nerve-associated protein 25 (SNAP-25), the addition of E2 to mHypoA-55 strain, the development of Snap25 protein, and RT-qPCR analysis. SNAP-25 is the most important factor controlling the secretion of E2.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Establishment of Immortalized Cell Lines Derived from Rat AVPV and ARC Kisspeptin Neurons

大鼠 AVPV 和 ARC Kisspeptin 神经元衍生的永生化细胞系的建立

DOI：
发表时间：
2018
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kei Horihata;Naoko Inoue;Nahoko Ieda;Yoshihisa Uenoyama;Yuta Suetomi;Fuko Matsuda;Kei-ichiro Maeda;Hiroko Tsukamura
通讯作者：
Hiroko Tsukamura

新規なキスペプチン遺伝子（Kiss1）発現制御因子の探索

寻找新型 Kisspeptin 基因 (Kiss1) 表达调节因子