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ペプチドループ配座と配位結合を利用したウイルス状巨大有限集合体の構築

使用肽环构象和配位键构建病毒样巨型有限聚集体

基本信息

批准号：
17J07449
负责人：
山上樹也
金额：
$ 1.6万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-04-26 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

平成31年度には人工βバレル構造の構築を単結晶X線構造解析によって明らかにしたが、種々の溶媒への溶解性が著しく低く、その溶液構造の解析には至らなかった。これは、細胞膜中に存在する天然のβバレルタンパク質と同様の挙動であった。そこで、令和元年度は、人口βバレル構造の有機溶媒への可溶化を目指した。まずは、前年度から引き続き、核磁気共鳴分光法（NMR）によって溶液構造を検証することとした。人工βバレル構造を構成するオクタペプチド配位子にジエチレングリコール鎖を１あるいは２つ導入することで、バレル構造を可溶化できることを見出した。このβバレル構造は、クロロホルム/アルコールという比較的低極性の有機溶媒に可溶であり、溶液中でのNMR測定によって構造解析を行うことができた。NMR測定の結果、可溶化したβバレル構造は、溶液中で2種類の構造の混合物として存在していることが明らかとなった。また、これら2つの構造間で、可逆的に構造変換していることも明らかとなった。さらに、2つのバレル構造の組成は、それぞれ6本及び8本のペプチド配位子から構成されるβバレル構造であることを単結晶X線構造解析によって明らかにした。一般にβバレルタンパク質の溶液構造をNMR及び単結晶Ｘ線構造解析法を用いて解明することは困難であり、今回、2つのバレル構造間での構造変換という動的挙動を解明することは、化学的のみならず、生物学的にも極めて重要な知見といえる。

Heisei 31 Artificial beta バレルStructural Construction and Simple Crystal X-ray Structure Analysisによって明らかにしたが, kind of 々のsolvent へのsolubility が出しくlow く, そのsolution structure のanalyze には to らなかった. There is natural β-glucose in the cell membrane, and it is the same as the raw material in the cell membrane.そこで, Reiwa first year は, population beta バレル structure のorganic solvent へのsoluble を Eye refers to した.まずは, previous year's からcitation き続き, nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR) によって solution structure を検证することとした. Artificial beta バレル structure を composition するオクタペプチド matching seat にジエチレングリコール lockを１あるいは２つ Import することで, バレルstructure をSoluble できることを见出した. A relatively low-polarity organic solvent of このβバレル structure and クロロホルム/アルコールというThe solvent is soluble and the solution is NMR and the structure is analyzed and the structure is analyzed. The results of the NMR measurement, the solubilized β-glucose structure, and the presence of the mixture of the two types of structures in the solution were revealed.また, これら2つのconstruct で, reversible にstructural change していることも明らかとなった.さらに、2つのバレルstructureの的は、それぞれ6 and 8のペプチドmatching seats Structure analysis of X-ray structure of されるβバレル structure であることを単. In general, the solution structure of the β-glucose material, NMR and the X-ray structure analysis method of the single crystal, are difficult to explain using the X-ray structure analysis method, this chapter, 2つのThe でのstructural change between the バレル structural changes and the 挙ることは of the することは, the のみならず of chemistry, and the にも extremely めてimportant and clear knowledge of the biology.