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動物の動脈硬化における免疫グロブリンと脂質代謝関連分子の役割について

免疫球蛋白及脂代谢相关分子在动物动脉硬化中的作用

基本信息

批准号：
17J09424
负责人：
潮奈々子
金额：
$ 1.6万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-04-26 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、採用1-2年目の結果を踏まえてアミロイド構成蛋白質としてアポリポ蛋白(Apo)A1と免疫グロブリンに候補を絞り、免疫組織化学的および生化学的手法でアミロイド構成蛋白質を同定することを目標とした。さらに、脂質沈着と免疫グロブリンの役割を解明するため、変性リポ蛋白に対する抗体の有無を検索した。採用1年目の質量分析でApoA1のC末側ペプチドが検出されたことから、ApoA1のC末ペプチドに対する抗体を作成した。この自作抗体および免疫グロブリンに対する市販抗体を用いて、水抽出法で得たアミロイド抽出物のウェスタンブロット解析を行った。その結果、アミロイド抽出物から全長のApoA1やκ鎖より低分子量のApoA1のC末端、N末端およびκ鎖が検出された。一方、同一個体の血清中にこれらの断片化したApoA1やκ鎖は検出されなかった。また、アミロイド線維や血管アミロイドの電子顕微鏡観察では9-15nmの繊維状構造物が観察され、繊維状構造物に近接して脂質と思われる空隙が観察された。さらに、変性リポ蛋白に対する自己抗体の有無をウェスタンブロット解析および蛍光二重免疫染色で検索したところ、血管アミロイド症例の血清中に酸化LDLに対する抗体が検出された。これらのことから、イヌの血管アミロイドは断片化したApoA1やκ鎖がアミロイド構成蛋白であることや、脂質沈着に関連してアミロイド線維が形成されること、さらには罹患犬の血清中では抗酸化LDL抗体が増加する可能性が考えられた。

This year, we used the results of 1 - 2 years to determine the identity of protein components. The presence or absence of antibodies against lipid metabolism and immune response ApoA1 and ApoA1 C-terminal antibodies were generated by 1-year mass analysis. The self-made antibody and the immune system are used to analyze the immune system extract. As a result, the total length of ApoA1 and the C-terminal and N-terminal residues of ApoA1 with low molecular weight were detected. A party, the same individual in the serum of the fragment of ApoA 1 or κ lock out of the box. In addition, electron microscopy of the blood vessel and the blood vessel showed that the 9 - 15 nm micro-structure was observed, and the micro-structure was adjacent to the lipid and the void was observed. The presence or absence of anti-LDL antibodies in the serum of patients with vascular disease was detected by double immunostaining. The possibility of increased levels of anti-LDL antibodies in the serum of infected dogs was examined.