Optimiertes ß-Faltblattmodul für die effektive Expression von Fab-Fragmenten in E.coli

优化的 Χ-sheet 模块可在大肠杆菌中有效表达 Fab 片段

基本信息

项目摘要

Das vorliegende Projekt hat zum Ziel, durch die Erzeugung von Zufallsmutationen sowie durch lokale Randomisierungen spezieller Positionen in den konstanten ß -Faltblatt-Domänen der leichten und schweren Kette eines Fab-Fragments mit anschließender Selektion von im Periplasma bevorzugt exprimierten Varianten mittels Phage-Display Aminosäurepositionen zu identifizieren, die für eine optimale Faltung, Stabilität und Ausbeute des kompletten Fragments vonBedeutung sind.Als Modell sollen die variablen Regionen des murinen anti-p24 (HIV-1) Antikörpers CB4-1 in Verbindung mit partiell randomisierten bzw. mutierten murinen und humanen konstanten Domänen verwendet werden. Als Target für die Selektion dient das Epitoppeptid des CB4-1. Für selektierte Fab-Varianten dieses Antikörpers sollen folgende Parameter analysiert werden: Proteinausbeute der Expression, Affinität zum Epitoppeptid, Faltungskinetik, Stabilität und strukturelle Parameter, wobei die strukturelle Charakterisierung Aufschluß über die Bedeutung lokaler Interaktionen auf das Faltungsverhalten und die Gesamtstabilität des ß -Faltblatts geben soll. Durch Kombination der optimierten konstanten Domänen mit weiteren variablen Domänen unterschiedlicher Spezifität soll die generelle Verwendbarkeit solcher ß -Faltblattmodule für die Expressionsoptimierung von Fab-Fragmenten untersucht werden.
本项目通过在恒定的荧光标记区域中局部随机定位法对Zufallsmutationen进行筛选,筛选出一种Fab片段,该Fab片段具有选择性地选择于外膜周浆体中的可变噬菌体显示氨基定位法,以用于最佳荧光标记,Bedeutung sind.Als Modell sollen die variablen Regionen des murinen anti-p24(HIV-1)Antikörpers CB 4 -1 in Verbindung mit partiell randomisierten bzw.多人和多人的家庭都被韦尔登。选择CB 4 -1表位肽的靶点。为了选择合适的Fab-变异体,我们进行了韦尔登参数分析:表达蛋白、表位肽亲和性、Faltungskinetik、稳定性和结构参数,并将结构特征与Faltungsverhalten和Gesamtstabilität之间的相互作用进行了比较。DALKING Combination der optimierten constanten Domänen mit weiteren variablen Domänen unterscheedlicher Spezifität soll die generelle Verwendbarkeit solcher-Faltblattmodule für die Expressionsoptimierung von Fab-Fragmenten untersucht韦尔登.

项目成果

期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ patent.updateTime }}

Professor Dr. Wolfgang Höhne其他文献

Professor Dr. Wolfgang Höhne的其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

{{ truncateString('Professor Dr. Wolfgang Höhne', 18)}}的其他基金

Structural analysis of the anti-myc tag antibody 9E10 in complex with the c-myc epitope and the mutagenesis of the binding region for the characterization and optimization of the interaction
对与 c-myc 表位复合的抗 myc 标签抗体 9E10 进行结构分析,并对结合区域进行诱变,以表征和优化相互作用
  • 批准号:
    5355839
  • 财政年份:
    2001
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Research Grants
Verwendung von Peptidbibliotheken zur Auffindung von Chitinaseinhibitoren und strukturelle Charakterisierung der Wechselwirkung
使用肽库发现几丁质酶抑制剂和相互作用的结构表征
  • 批准号:
    5175022
  • 财政年份:
    1998
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Research Units
{{ showInfoDetail.title }}

作者:{{ showInfoDetail.author }}

知道了