Verwendung von Peptidbibliotheken zur Auffindung von Chitinaseinhibitoren und strukturelle Charakterisierung der Wechselwirkung

使用肽库发现几丁质酶抑制剂和相互作用的结构表征

• 批准号: 5175022
• 负责人: Professor Dr. Wolfgang Höhne
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Biochemie (CCM)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Units
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1997-12-31 至 2004-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5175022?language=en
• 关键词: Verwendung; von; Peptidbibliotheken; zur; Auffindung

Das bei Antikörpern beobachtete Phänomen der Polyspezifität, d.h. der Fähigkeit zur hochaffinen Bindung nicht-epitopanaloger Strukturen, ist auch bei anderen Proteinen hoher Erkennungsspezifität, z.B. bei Enzymen, zu beobachten. Typische Enzyminhibitioren der kompetiven Klasse, d.h. mit Bindung am aktiven Zentrum, sind jedoch überwiegend "substratanalog", im Sinne der epitopanalogen (=epitophomologen) Antigene im Falle der Antikörper. Aus der Literatur ist bekannt, daß für einen gegen Kohlenhydrate gerichteten Antikörper aus einer Phagendisplaybibliothek bindende Peptide aufgefunden werden konnten (Hoess et al., 1993; Valadon et al., 1996). Wir wollen für Chitinase, ein Poly-N-Acetylglucosamin-hydrolysierendes Enzym, unter paralleler Verwendung von synthetischen Peptidbibliotheken und Phagendisplay-Bibliotheken Peptide bzw. Peptidderivate auffinden, welche an Chitinase binden und die Aktivität des Enzyms hemmen. Durch komplette Substitutionsanalysen jeder Peptidposition wird die Bedeutung einzelner Reste für die Wechselwirkung mit dem Protein ermittelt. Als Modelle stehen zur Verfügung eine pflanzliche Chitinase (aus Phaseolus vulgaris) sowie die Chitinase eines parasitischen Wurms (Onchocerca volvulus). Optimierte Chitinase-Inhibitoren auf Peptidbasis lassen gegenüber konventionellen klassenspezifischen Chitinase-Inhibitoren wie Chitobiose oder Allosamidin eine höhere Spezifität gegenüber einzelnen Chitinasen erwarten, z.B. könnten auf diesem Wege Chitinasen humanpathogener Pilze oder Filarien ohne Funktionsbeeinträchtigung der humanen Chitinase neutralisiert werden. D-Peptide bilden diesbezüglich aufgrund ihrer Proteolysestabilität ein besonders interessantes Repertoire. Zur weiteren Charakterisierung der erwarteten Wechselwirkungen sind Strukturmodellierungen (flexibles Docking) sowie die Kristallisation und Röntgenkristallstrukturanalyse von Chitinase/Inhibitor-Komplexen vorgesehen.

Das be antikörpern beobachtee Phäomen der PolySpezifität，D.H.Der Fähigkeit zur Hochaffinen Bindung nht-epopopalogaler Strukturen，is auch be and derderen Proteinen Hoher ErkennungsSpezifität，z.B.bezymen，zu beobachten.Typische Enzyminhibitioren der komposven Klasse，D.H.麻省理工学院的Bindung am aktiven Center，sind jedochüberwiegendend“substratalalog”，im sinne der epecopopalogen(=epepopomologen)抗基因im Falle der antikörper。Aus der Writatur bekannt，da？füreinen gegen Kohlenhneten Antiichteten antikörper Aus einer Phagendisplaybibliothek bindende多肽aufgefunden werden konnten(Hoess等人，1993；Valadon等人，1996)。Wir wollen für几丁质酶，Ein Poly-N-乙酰氨基葡萄糖水解酶，在Verwendung von Syntischen Peptischen Peptidbibliotheken和PhagenDisplay-Bibliotheken多肽BZW的平行序列下，以及几丁质酶的结合和激活。在此基础上，分析了蛋白质在人体内的位置。ALS Modelle Stehen zur Verfügung eine pflanzliche几丁质酶(Aus Phaseolus Common Garis)Sowie die Chitinase eines parasitischen Wurms(Onchocerca Volverus)。最佳几丁质酶-抑制多肽基Lassen gegenüber konvenonellen KassenSpezifischen KassenSpezifischen Chitinase-Inhibitoren Wie Chitobiose On Allsamidin eine hö在这里专门介绍几丁质酶的抑制情况，Z.B.könten auf Diesem em Wege Chitinasen en Human病原体Pilze oder Filarien ohne Funkunknung der Human Chitinase Neursiert den.D-肽可膨胀为自已的蛋白质稳定的蛋白质，可供参与者选择。Zur weiteren Charakterisierung der erwarteen Wechselwirkungen sind StrukturModellierungen(灵活对接)Sowie die Kristallization and Röntgenkristallstrukturanalytic von Chitinase/Inhibitor-Komplexen vorgeshen.