Determination of RNA Structure by Magic Angle Spinning Solid State NMR Spectroscopy

魔角旋转固态核磁共振波谱测定 RNA 结构

基本信息

项目摘要

Magic angle spinning Festkörper-NMR-Spektroskopie (MAS NMR) hat sich in jüngster Zeit zu einer wichtigen Methode zur Strukturbestimmung von Biomolekülen entwickelt. Zusätzlich sollte sich diese Methode für Systeme einsetzen lassen, deren Untersuchung durch Flüssigphasen-NMR-Spektroskopie oder Röntgenstrukturanalyse auf Grund von Probeneigenschaften (Löslichkeit/ Kristallisierbarkeit) schwierig oder undurchführbar ist. Ziel des vorliegenden Projektes ist es, das Potential von MAS NMR zur Strukturbestimmung von RNA-Molekülen, die in pathogene Prozesse involviert sind, auszuloten und anzuwenden. Diese Arbeiten sollen an einer microsatellite expansion repeat RNA, die die molekulare Grundlage der myotonen Dystrophie (DM1) darstellt, und an RNA-Signalstrukturen, die für die enterovirale Replikation essentiell sind, durchgeführt werden. Experimente zur sequentiellen Resonanz-Zuordnung, zur Charakterisierung von Wasserstoffbrücken Netzwerken und zur Generierung von Abstands- und Torsionswinkel-Einschränkungen sollen an isotopen-markierter RNA entwickelt und eingesetzt werden. Die so gewonnenen strukturellen Informationen sollen dann mittels des Distanzgeometrie-gestützten Ansatzes zur Berechnung der dreidimensionalen Struktur von RNA-Molekülen führen.
魔角自旋Festkörper-NMR-Spektroskopie(MAS NMR)是一种新的生物分子结构测量方法。Zusätzlich sollte sich diese Methode für Systeme einsetzen lassen,deren Untersuchung durch Flüssigphasen-NMR-Spektroskopie or der Röntgenstrukturanalysis auf Grund von Probeneigenschaften(Löslichkeit/ Kristallisierbarkeit)schwierig or der undurchführbar ist.这些研究项目表明,MAS NMR对RNA分子结构的预测潜力,在致病过程中涉及到两个方面:一是对RNA分子结构的预测,二是对RNA分子结构的预测。本文研究了一种微卫星扩增重复RNA,即肌营养不良(DM 1)的分子基础,以及一种RNA信号结构,它是肠道病毒感染的必要条件。通过序列共振实验、水蒸汽桥网络特性实验和Abstands-和Torsionswinkel-Einschränkungen生成实验,可以得到同位素标记的RNA,并使之形成韦尔登。这种结构信息必须由RNA分子三维结构的距离几何测量方法确定。

项目成果

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