权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

透過型電子顕微鏡を用いた１分子トラッキングによるタンパク質の結晶化過程の解明

使用透射电子显微镜通过单分子追踪阐明蛋白质结晶过程

基本信息

批准号：
18J01470
负责人：
山崎智也
金额：
$ 2.33万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-25 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

溶液セルを用いた透過型電子顕微鏡法（TEM）は、結晶化の初期過程である核生成を明らかにできることが期待される一方、その瞬間を捉えることが非常に困難である。これは、既存の溶液セルを用いたTEMでは、観察視野内において結晶化を促進するように濃度などを変化させることが困難であるためである。これを解決するため、放射線分解と溶解度を極端に低下させる貧溶媒を併せた手法や電極を溶液セルに導入して結晶化を促進させる手法の検討を行った。前者の手法では、塩素酸ナトリウムが飽和したアセトン溶液に電子ビームを照射すると、塩化ナトリウムが結晶化することが分かった。一方、塩素酸ナトリウムが飽和した水溶液に電子ビームを照射しても結晶化は観察されなかった。これらのことは、まず、塩素酸イオンがアセトンの放射線分解によって生成した還元剤により還元され、塩化物イオンが生成したことを示す。また、アセトンに対する塩化ナトリウムの溶解度が非常に低いため、すぐに塩化ナトリウムが溶け切れなくなって結晶化したと考えられる。一方、水の放射線分解ではアセトンよりも強力な還元剤が生成する。これは水溶液でも塩化物イオンが生成していることが期待され、観察視野で結晶化剤濃度を増加できることが期待できる。後者の手法では、タンパク質分子を電極周囲に集めるには溶液セル自体を設計、作製しなければならないため、既存の電極が搭載されたチップを用いて溶液セルを作製し、コロイドを試料として、電場を印加したときの応答をその場観察した。電極周囲にコロイド粒子が集まり、それが結晶化する様子が観察された。このことは、今回用いた実験系をスケールダウンすることでタンパク質の結晶化に応用に期待できる。このため、タンパク質の結晶化用の溶液セルを設計し、作製に着手した。

The solution was analyzed by permeable electron microscopy (TEM) and the initial crystallization process. It is clear that the system is expected to be used in the first place, and it is very difficult for the solution to be quickly detected. In order to improve the performance of the solution, the existing solution is used to determine the temperature, the existing solution, the existing solution and the existing solution. It is necessary to analyze the solubility, the solubility and the solubility. In the former, the method is used, the acid solution is used to irradiate the temperature, and the solution is used to irradiate the temperature, and the results are crystallized to determine the temperature. On the other hand, the pure acid and the aqueous solution were used to monitor the temperature and the temperature of the aqueous solution. This is due to the high concentration of trace elements, such as radiation, radiation. The solubility is very low, the solubility is very low, and the solubility is very low. On the other hand, the radiation line of the water supply is used to analyze the strength of the system. The aqueous solution, the chemical compound, the temperature, the temperature and the temperature. The rest of the system is based on the automatic design of the solution, the use of the existing electrical equipment, the use of the solution, the application of the solution, the design of the solution, the monitoring of the material, the printing of the computer and the monitoring of the market. The electron microscope is used to analyze the particle collection and the crystallization of the electron microscope. This time, we will use the following information to make sure that we are looking forward to the end of the day. For the crystallization of the temperature and temperature measurement, the solution temperature was designed, and the experiment was done.