权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

長鎖ノンコーディングＲＮＡを介した遺伝子発現制御による霊長類特異的脳機能分化

通过长非编码RNA控制基因表达来实现灵长类动物特异性脑功能分化

基本信息

批准号：
18J21142
负责人：
亀田朋典
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-25 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18J21142/
关键词：
神経幹細胞ノンコーディングRNA 非コードRNA エピジェネティクス

项目摘要

iPS細胞由来ヒト神経幹細胞株AF22を用いて、マウスと比較してヒト神経幹細胞で高発現しているMEIS1-pancMEIS1ペアの機能を調べた。MEIS1 mRNAをノックダウンしたところ、神経幹細胞マーカー遺伝子SOX2とPAX6の発現量が有意に減少することを明らかにした。これはマウスと比較して霊長類神経幹細胞においてMEIS1遺伝子の発現量が高いことが霊長類神経幹細胞のより長期間に渡る幹細胞性維持に寄与しうることを示唆している。次にpancRNAをノックダウンしたところ、パートナーのMEIS1 mRNAの発現が有意に減少した。このことから、pancMEIS1はヒト神経幹細胞においてMEIS1 mRNAの発現を正に制御しており、このpancRNAの有無がMEIS1遺伝子の発現量の種差を生み出す原因の一つである可能性が示唆された。次にヒトiPS細胞を用いた大脳皮質三次元培養法でMEIS1の機能解析を行った。培養50日目にレンチウイルスを用いてMEIS1 mRNAのノックダウンを試みた。53日目にEdu処理し、MEIS1 ノックダウンによる神経幹細胞の細胞周期を調べたところ、MEIS1のノックダウンはオルガノイド内の神経幹細胞の細胞周期を促進していることがわかった。さらに60日目にGFP陽性細胞の神経分化傾向を未成熟神経細胞マーカーと幹細胞マーカーの共染色により調べたところ、MEIS1のノックダウンにより神経幹細胞の割合は減少し、未成熟神経の割合が増加していることを見出した。これらの結果はMEIS1の高発現が霊長類神経幹細胞に見られるゆっくりとした発生や増殖という特徴に寄与していることを示唆している。本年度の研究より霊長類特異的pancMEIS1がMEIS1 mRNAの発現を増強すること、MEIS1遺伝子の高発現が霊長類の大脳皮質の拡大に寄与しうることが考えられた。

The origin of iPS cell line AF22 cell line is higher than that of MEIS1-pancMEIS1 cell line. The MEIS1 mRNA said that it was not necessary to make sure that the child SOX2 was not the only one, and that the child PAX6 was interested in the amount of money. The number of cells is higher than that of MEIS1. The number of cells is higher. The number of cells is higher than that of the control. In the second pancRNA session, you will find that you are interested in reducing the number of people you are interested in. The reason for this is that the pancMEIS1 system is in the process of controlling the situation, and that the pancRNA has no MEIS1 data. The reason for the failure is the possibility of failure. The secondary iPS cell can be used to analyze the data by using the three-dimensional culture method of MEIS1. On the 50th day, we will try to use the MEIS1 mRNA program to test the price. 53-day Edu