プロテオーム解析とiPS細胞モデルを用いた術後肺動静脈瘻発生関連因子に関する研究

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本研究では、網羅的ペプチド解析とイメージング質量分析法を含む最新の蛋白解析手法を用いて、これまで存在が推測されてきたが未だ特定には至っていない、肺動静脈瘻の発生に関与すると考えられている特異的物質「hepatic factor」を同定し、肝肺症候群に対する治療法へつながる知見を取得することを目的とする。さらにヒトiPS細胞を用いたヒト肺動静脈瘻モデルに対する候補化合物の投与による肺動静脈瘻治療および予防効果の検討を行い、臨床応用の可能性を検証する。その成果は治療薬の開発に直接的につながることが期待され、機能的単心室に対する治療成績の改善が見込まれる。本年度は主に以下の2項目について研究開発を進めた。1 上大静脈・下大静脈からの血液検体のサンプリング：検体採取の対象者は、3歳未満の先天性心疾患患者で、診断・治療目的に心臓カテーテル検査を必要とする者であった。本年度においては対象者5名よりサンプリングを実施した。上大静脈および肝静脈において、それぞれ２mlの静脈血を採取した。2 血液サンプル内のタンパク分析：採取した血液サンプルの遠心分離により血清を採取し、測定機関（同志社大学 生命医科学部 医生命システム学科 池川研）に運び、MALDI-TOF/MS式の質量分析器（rapifleX（Bruker社）など）によるイメージング質量分析における特異的シングルピークを同定した。上記の結果に加えて、tims TOF Pro with anoElute (Bruker Daltonik社)を用いたショットガン解析による網羅的蛋白解析を行い、既存のヒトプロテオームライブラリを用いたソフトウェア解析により、統計学的有意には至らないまでも有意である可能性がある、「上代静脈血に含まれず」かつ「肝静脈血に含まれる」複数の蛋白をhepatic factorの候補として同定した。