Neuron-specific persistent cytomegalovirus infection in the developing cerebrum

发育中大脑中神经元特异性持续性巨细胞病毒感染

• 批准号: 21K07816
• 负责人: 小杉 伊三夫
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07816/
• 关键词: サイトメガロウイルス; 脳発達障害; 周産期; 神経細胞特異的エンハンサー; e1-プロモーター; 持続感染; 大脳神経細胞

21年度までの実績：MCMV-e1-proにおいて転写開始点からnt -172までがMCMV-IE3結合によるe1-pro活性化に必須とされている．しかし，nt -1000までにIE3結合モチーフが35個存在していることから，これらの結合モチーフがIE3結合によるe1-pro活性化にどの程度関与するかについて検討を行った．転写開始点から，nt -943, nt -839, nt -556, nt -449, nt -193までのe1-pro領域を欠損したe1-proレポータープラスミド，p-e1proΔ943-EGFP, p-e1proΔ839-EGFP, p-e1proΔ556-EGFP, p-e1proΔ449-EGFP, p-e1proΔ193-EGFPを作成した．22年度実績：上記のプラスミドをpcDNA-MCMV-ie3と共にHEK293T細胞に導入し，EGFP発現を比較した．その結果，p-e1proΔ943-EGFP, p-e1proΔ839-EGFP導入細胞では，EGFP発現は極僅かであった．しかし，p-e1proΔ556-EGFP導入細胞で急激な発現増を認め，p-e1proΔ449-EGFP, p-e1proΔ193-EGFPでは暫時発現が増強していった．従って，nt -839までの上流域に存在するIE3結合モチーフもe1-pro活性化に関与し得ることが明らかとなった．このことからnt -449からnt -1373に存在する神経細胞特異的エンハンサーの作用にIE3の結合が関わると推測された．また，核移行シグナルの付いたAcGFP1を組み込んだMCMV作製を試みた．具体的にはpLtRt(NheI-)-e1pro1.4-EGFPをNheI/EcoRV Diggestionして，PCR増幅したAcGFP1-NucをNheI/EcoRV siteに組み込んで，pLtRt(NheI-)-e1pro1.4-AcGFP1-Nucを作製した．このトランスファープラスミドから相同組み換え用カセットを切り出し，相同組み換えによって，rMCMV-1373-nucとrMCMV-448-nucを作製することができた．

21 year ま で の be performance: MCMV - e1 - pro に お い て planning write starting point か ら nt - 172 ま で が MCMV - IE3 combining に よ る no.e1 - pro activeness に must と さ れ て い る. し か し, nt - 1000 ま で に IE3 combining モ チ ー フ が 35 exist し て い る こ と か ら, こ れ ら の combining モ チ ー フ が IE3 combining に よ る no.e1 - pro activeness に ど masato の degree and す る か に つ い て 検 line for を っ た. Planning to write start か ら, nt - 943, nt - 839, nt - 556, nt - 449, nt - 193 ま で を owe の no.e1 - pro field loss し た no.e1 - pro レ ポ ー タ ー プ ラ ス ミ ド, p-e1proΔ943-EGFP, p-e1proΔ839-EGFP, p-e1proΔ556-EGFP, p-e1proΔ449-EGFP, p-e1proΔ193-EGFPを is made as た. In 2022, the achievements were as follows: The above records include: プラス, ドを, pcDNA-MCMV-ie3と, co-introduction of にHEK293T cells に, and the occurrence of EGFP を comparison of た. The そ そ results showed that p-e1proΔ943-EGFP and p-e1proΔ839-EGFP were introduced into the cells で そ, and the occurrence of EGFP was extremely limited to であった. The cells introduced with <s:1> め, p-e1proΔ556-EGFP are rapidly stimulated な and increase を recognition め, while p-e1proΔ449-EGFP and p-e1proΔ193-EGFP are temporarily increased が and て った った った った. 従 っ て, nt - 839 ま で exist in the upper reaches of the の に す る IE3 combining モ チ ー フ も no.e1 - pro activeness に masato and し る こ と が Ming ら か と な っ た. こ の こ と か ら nt - 449 か ら nt - 1373 に exist す る god 経 cell specific エ ン ハ ン サ ー の role に IE3 の combining が masato わ る と speculation さ れ た. Youdaoplaceholder0, nuclear transition シグナ and シグナ are carried out by <s:1> たAcGFP1を group み込んだMCMV to make を test みた. Specific に に pLtRt(NheI-) -e1pro1.4-egfp をNheI/EcoRV Diggestion て, PCR amplification <s:1> たAcGFP1-NucをNheI/EcoRV siteに group み込んで pLtRt(NheI-) -e1pro1.4-acgfP1-nuc を is used to prepare た. こ の ト ラ ン ス フ ァ ー プ ラ ス ミ ド か ら み in same group え with カ セ ッ ト を り し, cutting the same set of み in え に よ っ て, rMCMV - 1373 - nuc と rMCMV - 448 - nuc を cropping す る こ と が で き た.

项目成果

Metformin reduces pleural fibroelastosis by inhibition of extracellular matrix production induced by CD90-positive myofibroblasts

二甲双胍通过抑制 CD90 阳性肌成纤维细胞诱导的细胞外基质产生来减少胸膜弹力纤维增生症

• 发表时间: 2021
• 期刊: American Journal of Translational Research
• 影响因子: 2.2
• 作者: Aoshima Yoichiro;Enomoto Yasunori;et al.
• 通讯作者: et al.

A Case of Pulmonary Tumor Thrombotic Microangiopathy Caused by Metastatic Ovarian Cancer: An Antemortem Diagnosis with Pulmonary Aspiration Cytopathology

转移性卵巢癌引起的肺部肿瘤血栓性微血管病一例：肺抽吸细胞病理学的生前诊断

• 发表时间: 2023
• 期刊: Intern Med
• 作者: Unno K;Ohtani H;Sakamoto A;Murakami H;Yagi H;Ito H;Baba S;Iwashita T;Kosugi I;Maekawa Y
• 通讯作者: Maekawa Y

周産期大脳神経細胞に特異的なサイトメガロウイルス早期遺伝子(e1)プロモーター活性化機構

围产期脑神经元特异的巨细胞病毒早期基因（e1）启动子激活机制

• 发表时间: 2021
• 作者: Watanabe Mizuki;Arii Jun;Takeshima Kosuke;Fukui Ayano;Shimojima Masayuki;Kozuka-Hata Hiroko;Oyama Masaaki;Minamitani Takeharu;Yasui Teruhito;Kubota Yuji;Takekawa Mutsuhiro;Kosugi Isao;Maruzuru Yuhei;Koyanagi Naoto;Kato Akihisa;Mori Yasuko;Kawaguchi Yasush;小杉伊三夫 他;小杉伊三夫 他;小杉伊三夫;小杉伊三夫;小杉伊三夫
• 通讯作者: 小杉伊三夫

大動脈粥状硬化病変におけるサイトメガロウイルス潜伏感染の病理組織学的解析

主动脉粥样硬化病变潜伏巨细胞病毒感染的组织病理学分析

• 发表时间: 2022
• 作者: Watanabe Mizuki;Arii Jun;Takeshima Kosuke;Fukui Ayano;Shimojima Masayuki;Kozuka-Hata Hiroko;Oyama Masaaki;Minamitani Takeharu;Yasui Teruhito;Kubota Yuji;Takekawa Mutsuhiro;Kosugi Isao;Maruzuru Yuhei;Koyanagi Naoto;Kato Akihisa;Mori Yasuko;Kawaguchi Yasush;小杉伊三夫 他
• 通讯作者: 小杉伊三夫 他

周産期大脳神経細胞に特異的なサイトメガロウイルス持続感染の解析

围产期脑神经元特异性巨细胞病毒持续感染分析

• 发表时间: 2021
• 作者: Watanabe Mizuki;Arii Jun;Takeshima Kosuke;Fukui Ayano;Shimojima Masayuki;Kozuka-Hata Hiroko;Oyama Masaaki;Minamitani Takeharu;Yasui Teruhito;Kubota Yuji;Takekawa Mutsuhiro;Kosugi Isao;Maruzuru Yuhei;Koyanagi Naoto;Kato Akihisa;Mori Yasuko;Kawaguchi Yasush;小杉伊三夫 他;小杉伊三夫 他;小杉伊三夫
• 通讯作者: 小杉伊三夫