Investigation for the regulatory mechanism of DNA double-strand break repair by nuclear myosin

核肌球蛋白修复DNA双链断裂的调控机制研究

• 批准号: 21K12244
• 负责人: 西 良太郎
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tokyo University of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K12244/
• 关键词: DNA二本鎖切断; 相同組換え修復; DNA修復; DNA二本鎖切断修復; 相同組換え; 核内ミオシン; クロマチン動態

電離放射線などにより生じるDNA二本鎖切断（DNA double-strand break: DSB）は最も細胞毒性の高いDNA損傷の一つであり、適切なDSBの修復はゲノムDNAの恒常性維持に必須である。ヒト細胞におけるDSB修復機構は、主に非相同末端再結合及び、相同組換え修復である。これらのうち、相同組換え修復は損傷を受けていない姉妹染色分体を鋳型としてDSBを修復するため、非常に忠実度の高い修復機構である。これまでに我々は、遺伝子領域に生じたDSBは、隣接する核内構造体（核スペックル）により制御される特異的な相同組換え修復によって修復される可能性を報告してきた。このことは、ヒト細胞核内では相同組換え修復は画一的な反応ではなく、DSBの置かれた周囲の環境によって制御される多様性に富む反応であることを示唆するが、未だその全容は不明である。そこで本研究では、相同組換え修復のサブパスウェイあるいは、新たな制御機構を解明するために、非相同末端再結合及び相同組換え修復の最上流で機能するMRN（MRE11-RAD50-NBS1）複合体 と相互作用する新規因子を探索した。MRN複合体を構成する因子のうち、MRE11はヌクレアーゼ活性を持つため、その制御が重要であると想定し、MRE11をベイトとした質量分析を行った。その結果、核内ミオシンがMRE11と相互作用することを見出したため、核内ミオシンのDSB修復における役割を明らかにすることを目的とした。そのために、核内ミオシンとの相互作用を特異的に欠失するMRE11変異体を作成し、この変異MRE11を発現する細胞株を用いて生物学的意義を明らかにすることとした。そこで本年度は、MRN複合体と核内ミオシンの相互作用部位の同定を、種々のMRE11変異体を用いて試みた。また、これに加えて、内在性の核内ミオシンをノックアウトした細胞株を樹立し、そのDSB修復における表現型を解析することにより、核内ミオシンによって制御されるDSB修復の解明を試みた。

DNA double-strand break: DSB) the most toxic DNA, the most toxic DNA, the Do not use the same end of the DSB repair machine to rejoin the same end, and the same structure to repair the machine. In the same group, the same system was tested in the same group, and the dye was separated by the sister. The DSB was used to repair the equipment, and the repair machine was very loyal. In the field of computer science and technology, you need to make a report on the possibility of DSB, which is the same as that of the nuclear system. The same group of devices in the nucleus of the cell, such as those in the nucleus of the cell, the anti-virus in the nucleus of the cell, the anti-virus in the nucleus, the anti-drug in the nucleus, the anti-virus in the nucleus, the anti-cancer in the cell, the anti-environmental protection in the environment and the control of the environment in the environment. In this study, the same device was used to modify the MRN (MRE11-RAD50-NBS1) complex, and the new control machine was used to understand how to recombine the end of the same tissue. MRN replicates are known to be factors, MRE11 agents, bioactive agents, critical agents, MRE11 replicates, quantitative analysis tools. The results, the interaction between the MRE11 and the DSB in the nucleus, the results, the results, and the results. In the nuclei, there is a lack of MRE11 in the nuclear interaction, and the cell line is in the sense of biology in the sense of biology. This year, the interaction sites of MRN and MRE11 copies in the nuclei were confirmed to be identical and tested. The results are as follows: in the nucleus, in the nucleus, in the cell line, in the nucleus, in the nucleus.

项目成果

Integrative understanding of homologous recombination repair orchestrated by USP42-DHX9 axis

对 USP42-DHX9 轴协调的同源重组修复的综合理解

• 发表时间: 2023
• 作者: Mizuho Okamoto;Masanori;Shimogishi;Akari Nakamura;Yusuke Suga;Kyosuke Sugawara;Michio Sato;Ryotaro Nishi;Akio Fujisawa;Yorihiro Yamamoto;Misato Kashiba;Ryotaro Nishi
• 通讯作者: Ryotaro Nishi

DNA-RNA helicase DHX9のリン酸化がDNA二本鎖切断応答に果たす役割の解明

阐明 DNA-RNA 解旋酶 DHX9 磷酸化在 DNA 双链断裂反应中的作用

• 发表时间: 2023
• 作者: 松谷 咲采;土屋 唯菜;池亀 颯稀;西 良太郎
• 通讯作者: 西 良太郎

DNA-RNA helicase DHX9の動態解析

DNA-RNA解旋酶DHX9的动力学分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 土屋 唯菜;松谷 咲采;西 良太郎
• 通讯作者: 西 良太郎

DExH Box Helicase, DHX9による相同組換え修復の促進に重要なドメインの解析

通过 DExH Box Helicase, DHX9 分析对促进同源重组修复重要的结构域

• 发表时间: 2022
• 作者: 土屋 唯菜;松谷 咲采;池亀 颯稀;阿部 友理菜;西 良太郎
• 通讯作者: 西 良太郎

DHX9による相同組換え修復の促進に必要なドメインの同定と解析

DHX9 促进同源重组修复所需结构域的鉴定和分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 土屋 唯菜;松谷 咲采;池亀 颯稀;西 良太郎
• 通讯作者: 西 良太郎