植物リボソームストレス応答の分子機構の実態解明

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本研究は、植物のリボソームストレスのシグナル伝達機構の一端を明らかにすることを目的としている。その目的のために、植物のリボソームストレスシグナルに関与するリボソームタンパク質RPL12B及びユビキチンリガーゼSZK2の周辺で機能している相互作用因子の同定およびその機能解析を行う。また、RPL12がサブユニットとなっているリボソームのP-stalkがリボソームストレス時ふるまいを変える可能性についても解析を行う。本年度は、シロイヌナズナのプロテオームに関して網羅的に相互作用因子を探索した先行研究（ARABIDOPSIS INTERACTOME MAPPING CONSORTIUM, 2011）によりSZK2との相互作用の可能性が示された尿素代謝酵素複合体サブユニットUREFに着目して解析を行った。その結果、Yeast-2-hybrid法によりSZK2との相互作用が陽性であり、且つ、リボソームストレス応答の抑圧変異としてとられたszk2-1R316Wとは陰性であった。このことからSZK2-UREFの相互作用がリボソームストレスシグナルに重要であることが示唆された。一方で、CRISPR-Cas9法を用いてurefに変異を起こさせた系統を作出した結果、リボソームストレス応答を抑圧するといった影響はみられなかった。そこで、今後は何らかの条件特異的にuref変異がリボソームストレス応答を抑圧する可能性について検証する。また、SZK2が、UREFが司る尿素代謝に関与している可能性についても検証していく。