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モノソミーカイコ出現メカニズム解明と常染色体遺伝子量補正の検証

家蚕单体出现机制的阐明及常染色体基因剂量校正的验证

基本信息

批准号：
22K05669
负责人：
佐原健
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Iwate University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K05669/
关键词：
カイコモノソミー第2染色体 qPCR BAC-FISH 染色体遺伝子量補正

项目摘要

モノソミー個体の獲得に必要なSy雌とre9もしくはYs11雄を交配した越年卵からは2022年春、即時浸酸卵からは2022年夏にそれぞれF1卵を孵化させた。「遅れ小蚕」は、成長のみならず孵化も遅れることを見出しており、初発から3日目以降の個体を飼育した。飼育において成長不良の小型個体を選抜飼育した。第8（Met1）と第15染色体（RpL5）を参照し、第2染色体上の23プライマーによるreal time qPCR系を確立した。5プライマーによる1次スクリーニングで、Syの第2染色体小断片を含む「ニセモノ」の検出を行ったところ、春世代に3個体（Syr02, 05, 07）、夏世代に3個体（SyYs38, 39, 41）が認められた。確立された23プライマー検定によりモノソミーと判定されたのはSyr03のみだった。本雄個体に複数のp50雌を交配し、得られた次世代のうち3系統のモノソミーを得た。これらモノソミー（3096, 310, 314）雄はp53雌と交配し、越年卵として保存中であり、来春に飼育予定。系統維持中であったSyr09とSyr16のF3とF4世代にもモノソミー個体とともにそれぞれのモノソミー後代にさまざまな部分復帰（部分モノソミー）個体が検出された。このうち、1612モノソミー系統の後代より染色体標本を作製した。標本作成済みの個体のqPCR解析によりモノソミー個体と部分モノソミー個体が確認されている。これら部分モノソミー個体について復帰予測部位配列を含むBACプローブを選定し、FISH解析を進めている。Syについて染色体標本を作製し、W、Z、第2のBACプローブによるFISHを実施し、2分したWの他方へ転座している染色体特定を行った。その結果、第24染色体が関連していることが判明した。

モノソミーIndividual acquisitionにnecessaryなSyfemaleとre9もしくはYs11maleをmatingしたover-year eggからは2022 spring, instant pickling eggs からは2022 summer にそれぞれF1 eggs をhatchingさせた. 「遅れ小丝」は、Growth のみならずhatching も遅れることを见出しており、Initial 発から3 days after the individual をfeeding した. Breeding and breeding of small individuals with poor growth. The 8th (Met1) and 15th chromosome (RpL5) are used as reference, and the 23rd chromosomal real time qPCR system on chromosome 2 has been established. 5プライマーによる1 times スクリーニングで、Syの2nd chromosome small fragmentをContains 3 individuals of むニセモノの検出を行ったところ and 春世に (Syr02, 05, 07), 3 individuals of the summer generation (SyYs38, 39, 41) are recognized. Established された23プライマー検定によりモノソミーとdetermination されたのはSyr03のみだった. The original male individual is a plural number of p50 females, and the next generation is a 3-system system. The これらモソミー（3096, 310, 314）male is mated with 53 female, the new year egg is being preserved, and the breeding in the coming spring is scheduled. The system is under maintenanceにそれぞれのモノソミーThe descendants of にさまざまなpartial complex (part of モノソミー) individual が検出された.このうち, 1612モノソミーsystem's offspring よりchromosome specimens are produced. Specimen preparation: qPCR analysis of individual specimens, individual specimens of individual specimens, and confirmation of individual specimens. Partial analysis of the individual components and the predicted site alignment including BAC selection and FISH analysis are carried out. Syについてchromosome specimens are made, W, Z, 2nd のBAC プローブによるFISH を実士し, 2 points したW のOTHER Fang へ転seat しているChromosome specific を行った. As a result, the connection between chromosome 24 and chromosome 24 was determined.