Development of a contact hypersensitivity model using Th2-induced humanized mice

使用 Th2 诱导的人源化小鼠开发接触超敏反应模型

• 批准号: 22K06060
• 负责人: 大野 裕介
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Central Institute for Experimental Animals
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06060/
• 关键词: Th2細胞; ヒト化マウス; 接触性皮膚炎; IL-4; アレルギー

我々が確立したNOG-hIL-4 Tgは全身にhIL-4が発現し、移植したヒトPBMC由来CD4+T細胞のTh2細胞への分化が期待できる。これまでにCMVプロモーターおよびCAGプロモーター支配下にhIL-4を遺伝子挿入した2系統のNOG-hIL-4 Tgが樹立されているが、両系統におけるTh2細胞誘導性能の差については未解析であった。そこで令和4年度はまず両系統におけるTh2細胞誘導性の比較解析を行い、どちらの系統がよりTh2誘導型ヒト化マウスとして至適であるか評価を行った。脾臓CD4+T細胞のmRNA発現を次世代シークエンサーで網羅的に解析したところ、CAG-hIL-4 Tgの方がGATA3やTh2細胞関連遺伝子の発現が高い傾向にあった。またFACS解析により、CAG-hIL-4 Tgはより高頻度でhIL-4産生CD4+T細胞を誘導することが分かった。以上より、CAG-hIL-4 Tgでより高いTh2誘導性が示されたため、次にハプテン塗布による接触性皮膚炎の誘導を行った。ヒトPBMC移植後4週にオキサゾロン(OXA)溶液を後背部に塗布し感作させ、その後計7回のOXA暴露により接触性皮膚炎を誘導した。皮膚切片の免疫組織化学染色(IHC)を行ったところ、CAG-hIL-4 Tgでのみ顕著な皮膚へのT細胞集積が観察され、従来型NOGマウスでは観察されなかった。また上記の結果はOXAを耳介塗布した実験系においても再現された。抗IL-4Ra抗体（デュピルマブ）を投与したところ、皮膚へのT細胞集積は抑制され、CAG-hIL-4 Tgを使用した接触性皮膚炎モデルはTh2細胞依存的な病態を示し、薬剤評価モデルとして本系統が有用であることを見出した。

We need to make sure that we can see the NOG-hIL-4 Tg, hIL-4 the whole body, and transplant the PBMC. The origin of the CD4+T cell, the Th2 cell, the differentiation cell and the expected cell differentiation. Under the control of the CMV system, the hIL-4 cluster was loaded under the control of the CAG system. The NOG-hIL-4 Tg of the 2 system was affected. The Th2 cell of the system failed to analyze the poor performance. Please compare the performance of the Th2 system with that of the previous year. Do not change the performance of the Th2 system. This is the most important thing to do. Spleen CD4+T cell mRNA shows that the analysis of the next-generation network, the GATA3 of GATA3, the cell phone of the Internet, and the cell phone of the CAG-hIL-4 Tg network show a high level of error. The FACS analysis system, the CAG-hIL-4 Tg analysis system, the high degree of hIL-4, the CD4+T cell guidance, the data analysis, and the data analysis. The above information, CAG-hIL-4 Tg, high-level Th2 sex shows that the contact dermatitis is caused by contact dermatitis. Four weeks after PBMC transplantation, the back was clogged with OXA solution, and the contact dermatitis was induced after 7 times of OXA exposure. Immunohistochemical staining (IHC) was performed on the skin sections, and CAG-hIL-4 Tg staining was performed on the skin sections. The cells were examined by cell collection assay, and the incoming NOGLs were detected by immunohistochemistry. The results show that the OXA ear is very sensitive to the appearance of the disease. Anti-IL-4Ra antibody (anti-Th2 antibody) was injected into the cells of the patients with contact dermatitis (contact dermatitis) and Th2 (cell-dependent disease).