Development of a contact hypersensitivity model using Th2-induced humanized mice

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我々が確立したNOG-hIL-4 Tgは全身にhIL-4が発現し、移植したヒトPBMC由来CD4+T細胞のTh2細胞への分化が期待できる。これまでにCMVプロモーターおよびCAGプロモーター支配下にhIL-4を遺伝子挿入した2系統のNOG-hIL-4 Tgが樹立されているが、両系統におけるTh2細胞誘導性能の差については未解析であった。そこで令和4年度はまず両系統におけるTh2細胞誘導性の比較解析を行い、どちらの系統がよりTh2誘導型ヒト化マウスとして至適であるか評価を行った。脾臓CD4+T細胞のmRNA発現を次世代シークエンサーで網羅的に解析したところ、CAG-hIL-4 Tgの方がGATA3やTh2細胞関連遺伝子の発現が高い傾向にあった。またFACS解析により、CAG-hIL-4 Tgはより高頻度でhIL-4産生CD4+T細胞を誘導することが分かった。以上より、CAG-hIL-4 Tgでより高いTh2誘導性が示されたため、次にハプテン塗布による接触性皮膚炎の誘導を行った。ヒトPBMC移植後4週にオキサゾロン(OXA)溶液を後背部に塗布し感作させ、その後計7回のOXA暴露により接触性皮膚炎を誘導した。皮膚切片の免疫組織化学染色(IHC)を行ったところ、CAG-hIL-4 Tgでのみ顕著な皮膚へのT細胞集積が観察され、従来型NOGマウスでは観察されなかった。また上記の結果はOXAを耳介塗布した実験系においても再現された。抗IL-4Ra抗体（デュピルマブ）を投与したところ、皮膚へのT細胞集積は抑制され、CAG-hIL-4 Tgを使用した接触性皮膚炎モデルはTh2細胞依存的な病態を示し、薬剤評価モデルとして本系統が有用であることを見出した。