Understanding of A potential defense mechanism against amyloid deposition in cerebellum

了解小脑淀粉样蛋白沉积的潜在防御机制

• 批准号: 22K06466
• 负责人: 舟本 聡
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Doshisha University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06466/
• 关键词: アルツハイマー病; アミロイドβ; 大脳皮質; 小脳; リンパ節; クリアランス; 神経変性疾患

加齢によるAb42排出の影響を調べるために、2ヶ月齢と15ヶ月齢マウスの大脳皮質と小脳にHilyte Fluor-555標識Ab42を定位注入し、スライス標本での観察を行った。その結果、これらのマウス間で、大脳皮質と小脳に注入した蛍光標識Ab42分布域の差は認めらず、小脳についてはいずれの月齢のマウスでもAb42の拡散と排出が顕著だった。しかし、高齢マウスの検体数が十分ではないので、引き続き検討を重ねる予定である。これまで、脳領域のAbの拡散や排出の観察はAb42に限定していたが、これまで得られた知見がAb特有の拡散や排出の違いか否かを検討するために、Ab42の対照として、そのアミノ酸配列をランダムにしたAb42（FAM標識スクランブルAb42）についても検討した。その結果、大脳皮質に注入した場合よりも、小脳に注入した方がわずかにFAM標識スクランブルAb42の拡散が速い傾向が見られたものの、大脳皮質と小脳の双方でFAM標識スクランブルAb42注入後2時間で拡散のピークを迎え、その後は同程度に拡散域が減弱していた。この観察結果は、小脳でAb42の拡散と排出が盛んなのは、アミノ酸組成よりもアミノ酸配列に依存することを示唆している。次にAb拡散や排出について、Ab分子種の違いについて検討した。これには、Hilyte Fluor-555標識Ab40を大脳皮質と小脳に定位注入して、Ab42での知見と比較した。その結果、Hilyte Fluor-555標識Ab40の場合でも、小脳では拡散が大脳皮質の５倍ほど速く、3日目には顕著に減弱していた。ただし、Hilyte Fluor-555標識Ab40の場合は、Hilyte Fluor-555標識Ab42を注入した場合よりも拡散や排出の程度は顕著ではなかった。

为了研究由于衰老而引起的AB42排泄的影响，将Hilyte Fluor-555标记的AB42立体定位注射到2个和15个月大的小鼠的脑皮质和小脑中，并在切成薄片的标本上进行观察。结果，没有观察到注射到脑皮质和小脑中的荧光标记的AB42的分布范围，并且在任何年龄的小鼠中，AB42的扩散和排泄对于小脑而言是明显的。但是，由于老年小鼠的标本数量不足，因此我们计划继续进一步调查。到目前为止，AB扩散和AB在脑区域中的AB扩散和排泄的观察仅限于AB42，但是为了调查到目前为止获得的发现是否是AB特异性扩散和排泄的差异，AB42（FAM标记的拼凑型AB42）与随机氨基酸序列还以AB42为对照。结果，尽管注射到小脑中的趋势比注射到小脑时的趋势要稍快，但在小脑皮层中的扩散和小脑在2小时后两小时都达到了峰值，在被批准的crampered crambled crambled to Ab42和该区域相似的范围都相似。该观察结果表明，小脑中AB42扩散和排泄的增殖更多地取决于氨基酸序列，而不是氨基酸组成。接下来，我们检查了AB分子物种在AB扩散和消除方面的差异。这是通过立体定位注射将Hilyte Fluor-555标记的AB40放入大脑皮层和小脑中，并与AB42的发现相比。结果，即使在Hilyte Fluor-555标记的AB40的情况下，小脑的扩散速度也比小脑皮质的速度快五倍，并且在第三天被大大减弱。然而，在标记为AB40的Hilyte Fluor-555的情况下，扩散和疏散程度不如注射了标有AB42的Hilyte Fluor-555。