キラル・アキラル複合型固定相のテイラーメイドと二次元LCを用いる医療シーズ探索

使用定制的手性/非手性复合固定相和二维液相色谱搜索药用种子

• 批准号: 22K06547
• 负责人: 秋田 健行
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06547/
• 关键词: HPLC; D-アミノ酸; 鏡像異性体; 光学分割カラム; バイオマーカー; 固定相; キラル; クロマトグラフィー; 生体試料分析; テイラーメード

生体内の様々な微量鏡像異性体について、同時に存在する大過剰の鏡像異性体からのキラル分離と多種多様な夾雑化合物からのアキラルな分離を両立させた複合型LC固定相を開発することを目的に、2022年度は（１）キラルセレクターの導入率や残存表面置換基量などを細かく制御した、再現的な複合型固定相合成法の確立、および（２）最適な固定相組成の合理的類推法の確立を目指した研究を行った。具体的には、逆相カラムでの十分な分離が困難なロイシン・イソロイシン・アロイソロイシンの、それぞれの鏡像異性体計６種の複合型LC固定相による一斉分離をひとつの目標に、①より精密なキラルセレクター導入率評価法の確立、②シリカゲル微粒子に対するキラルセレクター導入反応における反応条件の精査、③高キラル分離能キラルセレクターの開発、④シリカゲル表面残存アミノ基およびシラノール基のキャッピング法の検討、⑤固定相合成における再現性評価、⑥複合型LC固定相における保持時間の類推法の開発等を行った。これらの研究に関連した成果報告として、当該年度中に学会発表21件を行った。さらには、概念実証として、上記結果を二次元キラルHPLCに応用し、（３）ヒト尿試料や血漿試料、ヒト疾患モデル動物試料などの実試料をマトリックスとして、テイラーメイド複合型固定相を用いる微量鏡像異性体分析法の開発を進行中である。2023年度以降は、これまでの研究をさらに発展させ、対象鏡像異性体毎、試料マトリックス毎に複合型LC固定相の構造・組成を最適化することで、これまで困難であった、簡便かつ迅速な微量鏡像異性体の高選択的分析を可能とする。これにより、微量鏡像異性体の生体中での変動や機能の解析を加速し、医薬品やバイオマーカーなどの医療におけるシーズ探索を飛躍的に推進させる。

In 2022, the development of a complex LC stationary phase was aimed at (1) the introduction rate of a complex LC stationary phase and the residual surface replacement basis.(2) Research is being carried out to establish a reasonable analogy method for the optimal stationary phase composition. The specific separation of LC stationary phase and reverse phase system is very difficult. The separation of LC stationary phase consists of 6 kinds of mirror image heteromorphs. The purpose of separation is to establish the method of precise separation of LC stationary phase and reverse phase system. The fine conditions of reverse phase separation of LC stationary phase and reverse phase system.(3) Development of high separation energy,(4) Investigation of residual groups on LC surface,(5) Evaluation of reproducibility in stationary phase synthesis,(6) Development of complex LC stationary phase by analogy of holding time, etc. During the year, 21 reports were issued by the Institute. (3) The development of a micro-mirror isomeric analysis method for urine samples, plasma samples, animal samples and real samples is in progress. In 2023, the research on image mirror heteromorphism was developed, and the optimization of structure and composition of composite LC stationary phase was carried out. The analysis of dynamic functions in living organisms of micro-mirror images accelerates the development of medical products and medical research.

项目成果

Three-dimensional HPLC determination of serine/threonine/allo-threonine enantiomers in the plasma of patients with chronic kidney disease

三维高效液相色谱法测定慢性肾病患者血浆中丝氨酸/苏氨酸/别苏氨酸对映体

• 发表时间: 2023
• 作者: Mai Oyaide;Chiharu Ishii;Aogu Furusho;Masashi Mita;Takeyuki Akita;Tomomi Ide;Tomonori Kimura;Kenji Hamase
• 通讯作者: Kenji Hamase

Ser/Thr/aThrのキラル識別分析を可能とする高選択的三次元HPLC法の開発とヒト血中含量の解析

开发高选择性三维 HPLC 方法，可实现 Ser/Thr/aThr 的手性判别分析和人体血液含量分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 小柳出麻衣，石井千晴，藤井 暁;秋田健行，三田真史，長野正信，浜瀬健司;山元一輝，謝 金玲，石井千晴，秋田健行，三田真史，長野正信，井手友美，浜瀬健司;小柳出麻衣，石井千晴，秋田健行，藤井 暁，三田真史，長野正信，井手友美，浜瀬健司;長谷川美優，石井千晴，秋田健行，藤井 暁，三田真史，長野正信，浜瀬健司;永田優凜，古庄 仰，石井千晴，秋田健行，三田真史，浜瀬健司;小柳出麻衣，石井千晴，古庄 仰，秋田健行，三田真史，井手友美，浜瀬健司
• 通讯作者: 小柳出麻衣，石井千晴，古庄 仰，秋田健行，三田真史，井手友美，浜瀬健司

Pirkle型キラル固定相を用いるロイシン／イソロイシン／アロイソロイシン鏡像異性体の一斉分析

使用 Pirkle 型手性固定相同时分析亮氨酸/异亮氨酸/别异亮氨酸对映体

• 发表时间: 2022
• 作者: 山部真弓;石井千晴;秋田健行;三田真史;浜瀬健司
• 通讯作者: 浜瀬健司

アラニンおよび乳酸鏡像異性体の一斉分析を可能とする二次元HPLC法の開発と実試料における含量解析

开发二维 HPLC 方法，可同时分析丙氨酸和乳酸对映体并分析实际样品中的含量

• 发表时间: 2022
• 作者: 小柳出麻衣，石井千晴，藤井 暁;秋田健行，三田真史，長野正信，浜瀬健司;山元一輝，謝 金玲，石井千晴，秋田健行，三田真史，長野正信，井手友美，浜瀬健司;小柳出麻衣，石井千晴，秋田健行，藤井 暁，三田真史，長野正信，井手友美，浜瀬健司;長谷川美優，石井千晴，秋田健行，藤井 暁，三田真史，長野正信，浜瀬健司;永田優凜，古庄 仰，石井千晴，秋田健行，三田真史，浜瀬健司;小柳出麻衣，石井千晴，古庄 仰，秋田健行，三田真史，井手友美，浜瀬健司;小柳出麻衣，石井千晴，古庄 仰，秋田健行，藤井 暁，三田真史，長野正信，井手友美，浜瀬健司;永田優凜，古庄 仰，石井千晴，秋田健行，三田真史，浜瀬健司;古賀夢実，古庄 仰，石井千晴，藤井 暁，秋田健行，三田真史，長野正信，井手友美，浜瀬健司;山元一輝，謝 金玲，石井千晴，藤井 暁，秋田健行，三田真史，長野正信，井手友美，浜瀬健司
• 通讯作者: 山元一輝，謝 金玲，石井千晴，藤井 暁，秋田健行，三田真史，長野正信，井手友美，浜瀬健司

D-アミノ酸の微量分析を可能とする新規高性能Pirkle型キラル固定相の開発

开发新型高性能 Pirkle 型手性固定相，可实现 D-氨基酸的痕量分析

• 发表时间: 2022
• 作者: Mai Oyaide;Chiharu Ishii;Aogu Furusho;Masashi Mita;Takeyuki Akita;Tomomi Ide;Tomonori Kimura;Kenji Hamase;古賀夢美，中川雄太，石井千晴，藤井 暁，秋田健行，三田真史，長野正信，浜瀬健司;中川雄太，石井千晴，秋田健行，三田真史，浜瀬健司
• 通讯作者: 中川雄太，石井千晴，秋田健行，三田真史，浜瀬健司