Direct reprogramming of somatic cells by epithelial-mesenchymal transition

通过上皮间质转化直接重编程体细胞

• 批准号: 22K06808
• 负责人: 本橋 力
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06808/
• 关键词: ダイレクトリプログラミング; 上皮-間葉系転換; EMT; 間葉系細胞; 乳腺上皮細胞; エピジェネティクス; ダイレクト リプログラミング; 上皮間葉転換; 間葉系; 体細胞

令和4年度においては、以下の2つの研究を行った。研究1 EMT現象によるゲノムのエピジェネティック状態変化の解析：EMTが起きるとゲノムにエピジェネティック変化が生じ、それにともなって転写の活性が高いクロマチン状態に変化するのではないかと考え、マウス乳腺上皮細胞NMuMGを用いてその検証を行った。NMuMG細胞にEMT関連転写因子（4EMT-TFs）をレトロウィルスにより感染・過剰発現させてEMTを起こし、経日的に細胞をサンプリングし、Histone H3の9番目のLysのTri-Methylationに対する抗体（抗H3K9me3）とHeterochromatin associated proteins 1γ(HP1γ)に対する抗体(抗HP1γ)で免疫染色してクロマチン状態を解析した。一般に転写の活性が高いユークロマチン状態ではH3K9のTri-MethylationとHP1γは減じているといわれているが、EMTの前後でNMuMG細胞の核内の抗H3K9me3陽性率と抗HP1γ陽性率に違いは見られず、両者が減じている証拠は得られなかった。最近では、転写の活性が高いユークロマチン状態でも両者にはあまり変化はないという報告もあるため、違う指標も組み合わせてクロマチン状態の比較解析を行う予定である。研究2 EMT現象を利用したダイレクトリプログラミング法の検討：我々はこれまで神経堤細胞へのダイレクトリプログラミングの研究を通して、EMT現象が細胞にダイレクトリプログラミングされやすい環境を提供している可能性について検討してきた。本年度は、このことを乳腺上皮細胞の心筋細胞へのダイレクトリプログラミングで検証することを計画し、心筋細胞へのダイレクトリプログラミングに必要な転写因子のレトロウィルスベクターの構築と感染条件の検討を行った。

In the fourth year of the Reiwa era, にお にお て て, and the following <s:1> 2 て て research を lines った. Study 1: EMT Phenomenon によるゲノム によるゲノム エピジェネティッ エピジェネティッ <s:1> State Change <e:1> Analysis: EMT が up き る と ゲ ノ ム に エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ッ ク - born が じ, そ れ に と も な っ て planning write の high active が い ク ロ マ チ ン state に variations change す る の で は な い か と え test, マ ウ ス mammary gland epithelial cells NMuMG を with い て そ の 検 line card を っ た. NMuMG cells に EMT masato even planning to write factor (4 EMT - TFs) を レ ト ロ ウ ィ ル ス に よ り infection, a turning 発 now さ せ て EMT を up こ し, 経 に cells を サ ン プ リ ン グ し, Histone H3 の 9 times eye の Lys の Tri - Methylation に す seaborne る antibody (anti H3K9me3) と Heterochromatin associated proteins 1 gamma (HP1 gamma) に す seaborne る antibody (anti HP1 gamma) で immune dyeing し て ク ロ マ チ ン state を parsing し た. General に planning write の high active が い ユ ー ク ロ マ チ ン state で は H3K9 の Tri - Methylation と HP1 gamma は minus じ て い る と い わ れ て い る が, EMT の before and after で NMuMG cells の の nuclear resistance H3K9me3 positive と HP1 gamma positive resistance に violations い は see ら れ ず, struck が minus じ て い る card 拠 は Get られな った. Recent で は, activity planning write の が high い ユ ー ク ロ マ チ ン state で も struck the に は あ ま り variations change は な い と い う report も あ る た め, violations う index も group み わ せ て ク ロ マ チ ン state line の comparative analytic を う designated で あ る. Study 2 EMT phenomenon を using し た ダ イ レ ク ト リ プ ロ グ ラ ミ ン グ method の 検 please: I 々 は こ れ ま で 経 god dam cells へ の ダ イ レ ク ト リ プ ロ グ ラ ミ ン グ の research を tong し て, EMT phenomenon が cell に ダ イ レ ク ト リ プ ロ グ ラ ミ ン グ さ れ や す い environment を し て い る possibility に つ い て beg し 検 て き た. は this year, こ の こ と を mammary gland epithelial cells の heart muscle cells へ の ダ イ レ ク ト リ プ ロ グ ラ ミ ン グ で 検 card す る こ と を plan し, heart muscle cells へ の ダ イ レ ク ト リ プ ロ グ ラ ミ ン グ に な necessary planning write factor の レ ト ロ ウ ィ ル ス ベ ク タ ー の build と infection condition の 検 line for を っ た.

项目成果

Direct reprogramming of somatic cells into neural crest cells by epithelial-mesenchymal transition.

通过上皮-间质转化将体细胞直接重编程为神经嵴细胞。

• 发表时间: 2022
• 作者: 坂野上和奏;齋野朝幸;横山拓矢;平川正人;伊藤元;佐藤健一;本橋力
• 通讯作者: 本橋力