权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Calpain３変異による肢帯型筋ジストロフィーの発症メカニズムの解明

阐明 Calpain3 突变引起的肢带型肌营养不良症的发病机制

基本信息

批准号：
22K07014
负责人：
久恒智博
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07014/
关键词：
骨格筋筋ジストロフィーカルパインカルシウム

项目摘要

肢帯型筋ジストロフィーR1 (limb-girdle muscular dystrophy R1: LGMDR1)は、カルシウム依存性プロテアーゼのCalpain3を原因遺伝子とする進行性の筋ジストロフィーである。現在までに治療法は確立しておらず、LGMDR1の治療法の確立のためにもLGMDR1発症機序の解明は重要と考えられる。近年Calpain3を欠損したマウス(CAPN3KO)で筋小胞体のカルシウム貯蔵量が減少することが報告された。さらに、筋小胞体のカルシウム貯蔵量の減少がCalpain3の活性中心変異体のノックインマウス(C129S-KI)ではみられないことが明らかになった。このことから、Calpain3は酵素活性に依存しないメカニズムにより、筋小胞体カルシウム貯蔵量を制御することが考えられる。小胞体カルシウム貯蔵量の減少は細胞にとってストレスであるため、筋ジストロフィー発症機構に深い関わりがあると予想し、本研究ではCalpain3が筋小胞体カルシウム貯蔵量を制御する機構を明らかにすることを目指した。まず、本年度はCalpain3-WT, KO, KIマウス骨格筋より筋幹細胞を酵素処理法により取得し、in vitroで筋細胞に分化させ、筋細胞内のカルシウム動態を蛍光カルシウム指示薬により測定した。刺激はカルシウムポンプ阻害剤により行った。また、様々なCalpain3変異体を発現するプラスミドを構築し、HEK293細胞やCOS細胞、培養筋細胞においてその発現を確認した。

Limb-girdle muscular dystrophy R1: LGMDR1)は、カルシウムdependenceプロテアーゼのCalpain3をcause 伝子とするprogressive のsujiジストロフィーである. Nowadays, the treatment method of LGMDR1 has been established, and the treatment method of LGMDR1 has been established, and it is important to explain the mechanism of LGMDR1 disease. In recent years, there has been a report of a decrease in the storage capacity of Calpain 3 KO (CAPN3KO) cells.さらに、The active center variant of Calpain3 is reduced in the storage capacity of muscle cellsのノックインマウス(C129S-KI)ではみられないことが明らかになった.このことから、Calpain3はenzyme activity depends on しないメカニズムにより, muscle cell body カルシウムstorage amount をcontrol することが考えられる. The storage capacity of the small cell body is reduced, and the cell body is reduced.あるため、sugar ジストロフィー発社に深い关わりがあるI thought that this study was based on the Calpain3 small cell body and the storage capacity of the control system.まず、This yearはCalpain3-WT, KO, KIマウスbone lattice muscle muscle stem cell をenzyme treatment method によりobtained し、in The differentiation of tendon cells in vitro was measured, and the dynamic light intensity of the tendon cells in the tendon cells was measured. Stimulate the はカルシウムポンプ hinder the 剤により行った.また、様々なCalpain3 allogeneic を発appears するプラスミドをConstructionし、HEK293 cells and COS cells、cultured muscle cells においてその発appears and confirms した.