サルマラリア原虫接着分子とヒト受容体の結合解析

猴疟原虫粘附分子与人类受体的结合分析

• 批准号: 22K07043
• 负责人: 坂口 美亜子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07043/
• 关键词: Plasmodium knowlesi; サルマラリア原虫; 二日熱マラリア; 接着現象; Cytoadhesion; 人獣共通感染症

本研究の目的は、二日熱マラリアの重篤化に関与する Plasmodium knowlesi 寄生赤血球の接着機構を解明するため、P. knowlesi 接着分子が結合するヒト血管内皮細胞の受容体を同定し、相互作用を解析することである。まず最初に、すでに同定している P. knowlesi 接着分子の7つのシステインリッチドメイン（C1-C7）のうち、どの部位がヒト臍帯静脈内皮細胞（HUVEC）に結合するのかを評価するため、細胞外領域の全長及び各ドメインを含む小さな領域について GST タグを付与した組換えタンパク質をコムギ胚芽無細胞タンパク質合成系により作製したところ、想定していたよりも組換えタンパク質の収率がよくなく、またあるドメインで高い結合性が示されたものの新たに作製した組換えタンパク質において再現性が得られなかったため、本方法での結合解析は断念することになった。その代わりに、接着分子のドメインの細胞外領域のうちいくつかのドメインを除いた短い接着分子（C1-C4あるいはC4-C7）を発現する組換え P. knowlesi 原虫を作製し、どのドメインが接着に関与するのかについて HUVEC への結合性を評価することにした。また、HUVEC におけるヒト受容体の同定の際の参考情報とするため、 P. knowlesi 寄生赤血球の接着においてヒト受容体にはタンパク質成分が含まれるのかを確認する目的で、まず培養した HUVEC に対してかなり低濃度のプロテアーゼ処理を行い接着アッセイを試みた。しかし細胞の変形や部分的なプレート上の接着の阻害などが避けられず、ヒト受容体のみをうまく除去することができなかった。

The purpose of this study is to clarify the binding mechanism of Plasmodium knowlesi to vascular endothelial cells and to analyze the interaction between plasmodium knowlesi and vascular endothelial cells P. knowlesi is the first to be identified and identified in the 7-part chain of molecules (C1-C7), and the second to be identified in the umbilical vein endothelial cells (HUVEC). The total length of extracellular domain and the quality of each domain include GST, GST This method is based on a combination analysis method, in which the high degree of associativity is demonstrated by the new system, the quality of the composition, and the reproducibility. The extracellular domain of P. knowlesi is characterized by the presence of short linker molecules (C1-C4, C4-C7), and the interaction between P. knowlesi and HUVEC. For the purpose of determining the identity of HUVEC, P. knowlesi, and the identity of the host cell, HUVEC is cultured at low concentrations. The cell's shape and shape of the next part of the resistance, to avoid, to remove the container

项目成果

Identification of surfactin as an anti-severe fever with thrombocytopenia syndrome virus multi-target compound extracted from the culture broth of marine microbes

• DOI: 10.3389/fviro.2022.1064265
• 发表时间: 2023-03
• 作者: Shuzo Urata;Jun Takouda;Yoshihiro Watanabe;M. Sakaguchi;Yasuteru Sakurai;Yuki Inahashi;M. Iwatsuki;J. Yasuda;Yoshimasa Tanaka;K. Takeda

SICA-mediated cytoadhesion of Plasmodium knowlesi-infected red blood cells to human umbilical vein endothelial cells.

• DOI: 10.1038/s41598-022-19199-0
• 发表时间: 2022-09-02
• 期刊: SCIENTIFIC REPORTS
• 影响因子: 4.6
• 作者: Chuang, Huai;Sakaguchi, Miako;Lucky, Amuza Byaruhanga;Yamagishi, Junya;Katakai, Yuko;Kawai, Satoru;Kaneko, Osamu
• 通讯作者: Kaneko, Osamu