KRAS遺伝子変異導入モデルを用いたゴーハム病発症機序解明と新規治療薬の探索

利用KRAS基因突变模型阐明Gorham病的发病机制并寻找新的治疗药物

• 批准号: 22K07839
• 负责人: 野澤 明史
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07839/
• 关键词: ゴーハム病

KRAS Q61R変異を発現するトランスジェニックマウスの作製を行う。CAGプロモーター下にLoxP―STOP―LoxP（LSL）を介して KRAS（Q61R）cDNAと、この変異をもつ細胞を追跡できるGFP cDNAを配置した遺伝子断片を生殖細胞に導入したマウスを作製する（LSL-KRAS Q61R-GFPマウス）。これにより、Cre存在下でKRAS Q61R変異を発現するマウスが得られる。KRAS Q61R変異マウス（LSL-KRAS Q61R-GFPマウス）の作製に成功した後、破骨細胞に特異的にKRAS Q61R変異を発現させるために、タモキシフェン（TM）依存的に破骨細胞でCreを発現するマウス（Csf1r-CreERT2マウス）と交配し、TM依存的に破骨細胞でKRAS Q61R変異を発現するトランスジェニックマウスを作製する。同様に、リンパ管内皮細胞に特異的にKRAS Q61R変異を発現させるために、TM依存的にリンパ管内皮細胞でCreを発現するマウス（Prox1-CreERT2マウス）と交配し、TM依存的にリンパ管内皮細胞でKRAS Q61R変異を発現するトランスジェニックマウスを作製する。これらのマウスに、低濃度もしくは高濃度のTMを投与し、出生後に破骨細胞に低頻度もしくは高頻度でKRAS Q61R変異を発現させたトランスジェニックマウスと、出生後にリンパ管内皮細胞に低頻度もしくは高頻度でKRAS Q61R変異を発現させたトランスジェニックマウスを得る。

KRAS Q61R is different. CAG is the first to introduce LoxP-STOP-LoxP (LSL) into KRAS (Q61R) cDNA and to track GFP cDNA into germ cells (LSL-KRAS Q61R-GFP). KRAS Q61R is different from KRAS Q61R in the presence of Cre. KRAS Q61R variant (LSL-KRAS Q61R-GFP variant) was successfully produced by osteoclast-specific KRAS Q61R variant (Csf1 r-Creert2 variant) and by mating TM-dependent osteoclasts. KRAS Q61R expression in vascular endothelial cells of the same type and in vascular endothelial cells of the same type. High concentrations of TM are observed in postnatal osteoclasts with low frequencies of KRAS Q61R.