Novel regenerative therapy for liver failure with skeletal myoblast cell sheet transplantation

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まず，動物モデルにおける筋芽細胞シート移植の肝再生能の評価を行うべく，C57/BL6Jマウスを用いた非代償性肝硬変および肝切除後の肝不全モデルを作成し，このモデルに精製した筋芽細胞シートを移植し，肝再生能を評価した．筋芽細胞シートの作成は，本学において心不全改善効果を立証し，臨床応用しているものと同様に行った．非代償性肝硬変モデルはチオアセトアミド投与にて作成し，大量肝切除後の肝不全モデルはマウスに肝切除を行うことで作成した．これらのモデルにおいて，筋芽細胞シート移植による肝臓の線維化抑制効果を組織学的検討（H&E染色，Sirius-red染色，Masson Trichrome染色）にて確認した．また筋芽細胞シートを移植したマウスの肝細胞では，細胞増殖のマーカーであるKi67の発現が有意に亢進していた．さらに，筋芽細胞シートを移植したマウスにて，線維化に関連するマーカー（Acta2，Col1α1）の発現レベルが抑制されていることを確認した．また，血液検査では，移植後5週の時点で，筋芽細胞シート群の方がアルブミンが高値であり，AST，ビリルビンが有意に低値であることを確認した．さらに，肝臓の外側葉と中葉を切除する70%肝切除モデルでは筋芽細胞シートを移植したマウスにおいて，切除2日後に残肝重量の有意な増加を認め，さらにKi67陽性細胞率の増加および増殖シグナルの亢進が示された．さらに90%肝切除モデルを用いた検討も行った，このモデルでは，コントロール群では1日を超える生存は認められなかったが，それに対して筋芽細胞シート移植群では約半数で1日以上の生存が確認され、有意な肝切除後の生存期間の延長を認めた．これらの結果は，筋芽細胞シート貼付の肝線維化抑制による肝再生効果能を示唆するものであった．これらの結果を受けて，現在，筋芽細胞シートの効果の作用機序の解明を目指す実験の準備中である．