エクソソーム解析に基づく膵癌患者に対する治療効果予測および新規治療法の開発

基于外泌体分析的胰腺癌患者疗效预测及新疗法开发

• 批准号: 26861075
• 负责人: 富丸 慶人
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26861075/
• 关键词: 膵癌; エクソソーム; microRNA; 化学放射線療法

本研究では，膵癌患者の癌治療成績向上を目指し，近年治療耐性との関連が示唆されているmicroRNA（miRNA）に注目し，膵癌症例の体液中エクソソーム分画に存在するmiRNAの発現プロファイルを解析することで耐性に関わるmiRNAを同定し，その機序に基づいた治療効果予測モデルを構築することを目的とした．平成26年度の研究の成果としては，まず，膵癌患者の臨床検体における血液，尿，唾液，膵液などの体液から抽出したエクソソームに含まれるmiRNAの網羅的発現解析に基づく治療耐性に関連するmiRNAの同定することを目的として，この目標達成の予備実験として，エクソソームを抽出する手技の確立およびエクソソーム中に含まれるmiRNAを確認することとした．膵癌細胞株をテストサンプルとして，サンプルの培養上清中に含まれるエクソソーム分画を抽出し，エクソソームのマーカーである特定の蛋白質が同分画に一定の割合で含まれていることを確認した．この結果は，エクソソーム抽出が適切に行われていることを示すものであると考えられた．続いて，この抽出したエクソソーム分画をサンプルとして，特定のmiRNAを標的としたqRT-PCRを行い，特定のmiRNAが同分画内に含まれていることを確認した．また，同じサンプルに対してmiRNA網羅的発現解析（東レ社，miRNA microarray（3D-Gene miRNA Oligo chip））を行うことで，特定のmiRNAのみならず，多種のmiRNAが同分画内に含まれていることを確認した．

This study is aimed at improving the treatment performance of cancer patients. In recent years, microRNA (miRNA) has been shown to be associated with treatment tolerance. The presence of miRNA in body fluids of cancer patients has been identified. The analysis of miRNA related to treatment tolerance has been identified. The mechanism of miRNA related to treatment effect prediction has been established. The results of the study in 2006 showed that the clinical manifestations of cancer patients included blood, urine, saliva, and body fluid extraction, and the analysis of the occurrence of miRNA entrapment, and the identification of miRNA associated with therapeutic resistance. The miRNA in the miRNA is identified in the miRNA in the miRNA. Cancer cell lines are isolated from culture supernatants containing a variety of proteins and identified as having a certain amount of cleavage. The result is that the appropriate route is taken out. In addition, qRT-PCR was performed to identify specific miRNA targets in the same sub-picture. The miRNA microarray (3D-Gene miRNA Oligo chip) was developed to identify specific miRNAs in the same region.