Adenosine 5'-Monophosphate may prevent subsequent complications after sepsis

5-单磷酸腺苷可预防脓毒症后的后续并发症

基本信息

批准号：
22K09192
负责人：
近藤豊
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Juntendo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09192/
关键词：
敗血症 AMP 集中治療後症候群人工冬眠筋萎縮 ICU ATP 集中治療

项目摘要

本研究は予後不良な敗血症に対してアデノシン一リン酸（AMP）投与をおこなうことにより、敗血症回復後の脳・身体機能低下を防ぐことを目指すものである。身体機能に関わる骨格筋に注目し、初年度の実験をおこなった。生後8-10週齢のC57BL／6マウスに盲腸結紮穿孔術（CLP）を行い、AMP投与の有無によりその効果を比較・検討した。CLP処置から、5日後にマウスのヒラメ筋、前脛骨筋、腓腹筋、長趾伸筋を摘出し、機能形態的・分子学的評価をおこなった。組織染色をおこない筋断面積にて形態的変化を評価した。マウス用握力計を用いて前肢握力を計測したところCLP処置後3日以降で減少していたが、AMP投与により回復が認められた。さらに後肢の前脛骨筋の筋重量はCLP処置後5日目で減少していたが、AMP投与により増加が認められた。さらにマウス筋芽細胞であるC2C12細胞を用いてvitro実験をおこない、AMPの効果を検討した。まず筋芽細胞を筋管細胞に分化させ筋多核細胞とし、その後、エンドトキシン刺激に加えた。さらにAMP刺激の有無で群分けし、インキュベーターにて48時間培養した。その後、筋芽細胞のミオシン成分と核に対して、免疫染色をおこなった。結果、筋管細胞の核融合数、筋管面積、筋管幅が減少したが、AMP刺激により回復が認められた。これらの初年度の結果により、敗血症においてAMPが骨格筋萎縮の改善効果があることが示唆された。

这项研究旨在通过给败血症腺苷（AMP）施用败血症后的脑功能下降，败血症的预后较差。我们进行了第一年的实验，重点是与身体机能相关的骨骼肌。对8-10周龄的C57BL/6小鼠进行了盲肠连接和穿孔（CLP），并根据AMP给药的存在或不存在对其作用进行比较和检查。 CLP治疗后五天，切除小鼠，比目鱼，胫骨前，甲壳虫和伸肌长长，并进行功能性形态学和分子评估。在肌肉横截面区域评估了形态变化，并进行了组织染色。使用小鼠的握力测量了前肢握力强度，尽管CLP治疗后它降低了，但发现在给药后，它已被恢复。此外，在CLP治疗后5天，后肢胫骨前肌的肌肉体重减少，但在给药后增加了AMP。此外，我们使用C2C12细胞（小鼠成肌细胞）进行了体外实验，以研究AMP的作用。首先，将肌细胞分化为肌管细胞以形成肌肉核细胞，然后添加到内毒素刺激中。将该组进一步分组以存在或不存在AMP刺激，并在孵化器中培养48小时。之后，对肌球蛋白成分和成肌细胞的核进行免疫染色。结果，肌管融合的数量，肌管区域和肌管宽度减少，但通过AMP刺激观察到恢复。这些第一年的结果表明，AMP对改善败血症的骨骼肌萎缩有影响。