末梢神経損傷後にシュワン細胞と血管内皮細胞間で働く接着分子の解明

周围神经损伤后雪旺细胞和血管内皮细胞之间作用的粘附分子的阐明

• 批准号: 22K09330
• 负责人: 岩橋 徹
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09330/
• 关键词: 末梢神経再生; シュワン細胞; 血管内皮細胞; 接着分子; 接着因子

まず研究の第一段階として、未分化シュワン細胞と血管内皮細胞間の相互作用に働く因子を検索するため、in vivoのマウス坐骨神経損傷モデルにおける損傷神経のRNAシーケンスデータをNCBIより取得した。マウス坐骨神経損傷後初期での採取損傷神経から得られたデータをRstudio上で解析する事で、生体におけるシュワン細胞と血管内皮細胞間に働く接着分子候補を複数絞り込んだ（シュワン細胞側をA、血管内皮細胞側をBとする）。また、これらの候補分子が実際に再生過程初期の神経において発現しているのかを確認するため、ラット坐骨神経の人工神経移植モデルを用いた。左坐骨神経を5mm切断欠損させ、人工神経を用いて架橋を行った。術後7日に検体を採取し、人工神経移植部の凍結長軸切片を作製、蛍光免疫染色を行ったところ、人工神経両端部から侵入してくるシュワン細胞の先端部に比較的限局してAが、同様に血管内皮細胞の先端部にBの発現が見られ、これらはそれぞれの細胞の未分化マーカー分子の染色範囲と概ね一致していた。つまり、遊走段階にある未分化な細胞でのみこれらの候補分子が発現している事が考えられた。ただ、それぞれの細胞あるいは候補分子の染色のため、使用する抗体の選定や染色方法の条件検討のために期間を要した。これらの結果から、神経再生初期において神経断端から配列した血管内皮細胞に則してシュワン細胞が遊走する際には、AとBの相互作用が働いている可能性が示唆された。

The first stage of the study was the interaction between undifferentiated cells and vascular endothelial cells. In the early stage after sciatic nerve injury, the injured nerve was analyzed on Rstudio, and then the candidate molecules were divided into multiple groups (A on cell side and B on vascular endothelial cell side). The candidate molecules are used in the early stages of the regeneration process. The left sciatic nerve is 5mm short of damage, and the artificial nerve is used for bridging. 7 days after surgery, the frozen long axis section of the artificial nerve graft was prepared, and the light immunostaining was performed. The invasion of the end of the artificial nerve into the distal part of the vascular endothelial cells was limited. The development of the distal part of the vascular endothelial cells was similar. The molecular staining of the undifferentiated vascular endothelial cells was consistent. The undifferentiated cells and candidate molecules appear in the middle of the stage. The conditions for staining candidate molecules and for the use of antibodies are discussed. The results showed that the early stage of neurogenesis was associated with the migration of vascular endothelial cells, and the interaction between A and B was possible.