TNFスーパーファミリーを利用した軟骨再生薬開発のための基礎研究
利用TNF超家族开发软骨再生药物的基础研究
基本信息
- 批准号:22K09348
- 负责人:
- 金额:$ 2.66万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2022
- 资助国家:日本
- 起止时间:2022-04-01 至 2025-03-31
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
ヒト間葉系幹細胞を用いたin vitro 軟骨分化モデルの構築を行った。4種類のTNFスーパーファミリー分子LTA、TRAIL、VEGI、GITRLについて293細胞にアデノウィルスベクターを導入パッケージング、発現を確認した。LTAについては、パッケージングに時間がかかり現在効果検証中、VEGIについては発現に問題がありベクターの再構築が必要であった。一方GITRLとTRAILについてはヒトMSCに導入した場合、導入後1週間程度の早期からCOL2A1, SOX6, SOX9など軟骨の初期分化マーカーのmRNA誘導と、ALP染色陽性、alcian blue 染色陽性で示される軟骨基質の産生を認め、強い軟骨誘導能を認めた。とくにGITRLについてはパネルRNAを用いたRT-PCRによる解析で軟骨組織・軟骨細胞にかなり特異的に高発現していることが確認され軟骨分化誘導薬の候補として有望ではないかと考えられた。特異的受容体であるGITRの発現も同様に軟骨特異的であったためGITRのアデノウィルス発現系を作成したところGITRもヒト間葉系細胞を軟骨細胞様に分化させることが明らかになった。GITR/GITRLの組み合わせでさらに軟骨分化は促進された。市販の精製済みGITRLを使用して軟骨分化に必要な濃度を検証したところGITRLは従来の生理的な活性濃度よりかなり高濃度の100 ng/mL程度で軟骨分化誘導を促すことが明らかになった。現在リガンド・リセプターにGFPを挟みこんだ形の強制発現系を作成し恒常活性型の軟骨分化誘導因子としてワークするか検証中である。また末梢血由来の単核球分画にNFkBシグナルの転写因子RELAをアデノウィルスで導入すると間葉系幹細胞様の紡錘形細胞に一部分化することが分かったので、この細胞を増殖させたin vitro軟骨分化モデルを現在作成中である
Stem cells from mesenchymal stem cells are used in vitro cartilage differentiation. 4 kinds of TNF molecules LTA, TRAIL, VEGI, GITRL are introduced into 293 cells to confirm their presence. LTA When GITRL and TRAIL were introduced into MSCs, mRNA induction, ALP staining and alcian blue staining were positive at the early stage of differentiation of cartilage, and strong cartilage induction was detected one week after introduction. GITRL is a candidate for the induction of cartilage differentiation by RT-PCR analysis of cartilage tissue and chondrocytes. GITR development system was created for specific receptors and cartilage specific receptors. GITR development system was developed for mesenchymal cells and chondrocyte differentiation. GITR/GITRL is a combination that promotes cartilage differentiation. The use of commercially refined GITRL at concentrations necessary for cartilage differentiation is demonstrated by the physiological activity of GITRL at concentrations up to 100 ng/mL for cartilage differentiation induction. Now, the stress response system of GFP is constructed as a constantly active cartilage differentiation inducing factor. NFkB, RELA, RELA
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
自己血貯血時の高用量静注用鉄剤投与は貯血後・術前貧血の予防に有効である
自体采血期间高剂量静脉补铁可有效预防术后和术前贫血。
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:池田敏之; 寺田類; 小林佳子; 岡崎仁
- 通讯作者:岡崎仁
High-dose intravenous iron supplementation after preoperative autologous blood donation is useful to prevent post-donation/preoperative anemia
术前自体献血后大剂量静脉补铁有助于预防献血后/术前贫血
- DOI:10.1016/j.transci.2021.103348
- 发表时间:2021
- 期刊:
- 影响因子:1.9
- 作者:Ikeda Toshiyuki;Terada Rui;Nagura Yutaka;Okazaki Hitoshi
- 通讯作者:Okazaki Hitoshi
IH500 を用いたカラム凝集法による抗A,抗B 抗体価測定の基礎的評価
使用 IH500 通过柱凝集法测定抗 A 和抗 B 抗体滴度的基本评估
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:齋藤 涼佳;宮 真里;竹村 洋典;廣瀬有香,名倉豊,川端みちる,澤田良子,小堀恵理,中島一樹,高橋奈緒実,古谷江梨子, 池田敏之,岡崎仁
- 通讯作者:廣瀬有香,名倉豊,川端みちる,澤田良子,小堀恵理,中島一樹,高橋奈緒実,古谷江梨子, 池田敏之,岡崎仁
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技術講座 輸血 -step up編-クリニカルパスと自己血輸血
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岡崎 仁
自己血貯血後の高用量静注用鉄剤投与は貯血後・術前貧血の予防に有効である
自体采血后静脉注射大剂量铁剂可有效预防术后和术前贫血。
- DOI:
- 发表时间:
2022 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
池田 敏之;寺田 類;名倉 豊;小林 佳子;岡崎 仁 - 通讯作者:
岡崎 仁
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