糖尿病による骨癒合遅延に対する糖化ストレス解消療法の開発
糖化应激缓解疗法治疗糖尿病引起的骨愈合延迟的进展
基本信息
- 批准号:22K09395
- 负责人:
- 金额:$ 2.66万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2022
- 资助国家:日本
- 起止时间:2022-04-01 至 2025-03-31
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本年度は細胞内で産生されるメチルグリオキサール(MG)の細胞内動態および細胞障害性を評価した。マウス頭蓋冠由来骨芽細胞および骨髄血由来破骨細胞を作成し、MG反応性蛍光センサープローブを用いて細胞内で産生されるMGの時間依存的な増強を共焦点顕微鏡によるイメージングにて検出した。イメージングにては生細胞に対する核染色であるDAPIやゴルジ体など細胞小器官に対するGFP染色を同時に行うことで、細胞内の局在も明らかとした。また細胞外から低温処理により代謝を抑制することで、MGの細胞内産生が抑制されることを示した。一方高血糖による培養にてMG産生の増加を確認した。さらに細胞機能との評価を行い、骨芽細胞、破骨細胞が高血糖によるMGの細胞内産生増加に伴い、細胞機能を低下することをALP、TRACPのアッセイにより確認した。マウスの頭蓋骨を採取し、ex vivoにて培養を行い、骨内の細胞においてもMGが産生されており、高血糖によりMGが増加することを確認した。これらから、細胞内、また生体内において高血糖環境が細胞内MG産生を増加させること、また細胞障害に働くことを証明することができた。引き続き、細胞毒性および細胞増殖や遊走能の評価を行っている。破骨細胞についてはRANKLによる影響も大きいため、より生体内での環境に近づけるために共培養での評価も行う。またMGとRAGE、細胞機能との関連および、マウスによる骨修復能におけるMGの関与につき検討を進めていく。
This year, the intracellular dynamics and cellular impairment of MG were evaluated. The time-dependent increase in MG produced intracellularly by the formation of the skull cap from bone bud cells and bone marrow blood-derived osteoclasts, and the use of MG reactive luminescence center support cells, was demonstrated through an electronic display using a confocal microscope. DAPI staining for cells and small organs Extracellular hypothermia inhibits metabolism, and intracellular MG production is inhibited. Increase in MG production in a hyperglycemic culture Cell function evaluation, bone bud, osteoclast, MG intracellular production, ALP, TRACP, etc. The cells in the skull were cultured ex vivo, and MG production was confirmed. In vivo, intracellular MG production increases, and cellular impairment increases. In addition, it is necessary to evaluate the effects of apoptosis, cytotoxicity and cell proliferation. The osteoclast cells were co-cultured with RANKL in vitro. MG and RAGE, cell function, bone repair function, MG and RAGE
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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- 影响因子:0
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- 通讯作者:土屋 弘行
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- 影响因子:0
- 作者:松原 秀憲;下川 寛右;引地 俊文;加藤 仁志;土屋 弘行
- 通讯作者:土屋 弘行
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- DOI:10.15106/j_seikei73_423
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:松原 秀憲;引地 俊文;下川 寛右;土屋 弘行
- 通讯作者:土屋 弘行
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