ストレプトコッカスのバイオフィルム感染症治療に向けた研究

链球菌生物膜感染治疗的研究

• 批准号: 22K09953
• 负责人: 矢野 貴人
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09953/
• 关键词: バイオフィルム; ストレプトコッカス

ストレプトコッカス属細菌は口腔内の常在菌であるが、血中に侵入すると人工弁・弁膜症患者において感染性心内膜炎を引き起こす。これはバイオフィルムによる慢性・難治性感染症の典型例であり、抗生物質による治療は不可能で外科的な弁置換術が必要となる。ストレプトコッカス属細菌による難治性感染症の治療には、バイオフィルム形成を阻害するとともに、一旦形成されたバイオフィルムを不安定化・破壊するという二方面からのアプローチが必要である。申請者らはバイオフィルム形成開始シグナルの産生酵素であるComAの解析を行い、その知見をもとに、バイオフィルム形成を阻害する低分子化合物を得ている。本研究では、バイオフィルムの安定化に寄与していると考えられているDNA結合タンパク質HUの機能・構造解析を行い、バイオフィルムの不安定化・破壊を促す方策を見いだすとともに、バイオフィルム形成阻害剤との相乗効果についても解析する。本年度はS. mutans由来のHUタンパク質の大腸菌内での発現と精製の方法を確立し、得られたHUタンパク質のDNA結合能をゲルシフトアッセイにより解析した。また、HUタンパク質のDNA結合に関わると想定される部位に存在する塩基性アミノ酸残基に変異を導入した変異型HUを作製し、解析した。今後、S. mutansが形成するバイオフィルムに対するHUタンパク質の安定化の有無について検討する。

Bacteria belonging to this genus invade the blood and cause infective endocarditis in patients with congenital heart disease. Typical cases of chronic and refractory infectious diseases include: antibiotics, surgical replacement, etc. The treatment of refractory infections caused by bacteria is necessary in two aspects: prevention of infection and instability of infection once it is formed. The applicant is interested in obtaining low molecular weight compounds that can inhibit the formation of enzymes that produce comA and that can be used for the analysis of comA. In this study, we analyzed the function and structure of DNA-binding protein in the stabilization process of DNA binding protein, analyzed the instability and degradation of DNA binding protein, and analyzed the mechanism of DNA binding protein formation resistance. This year S. A method for the production and purification of HU protein from E. coli was established, and the DNA binding energy of HU protein was analyzed. The DNA binding site of HU protein is determined by the presence of different basic amino acid residues, and the analysis of HU protein is performed. In the future, S. Mutans are formed in the presence or absence of a stable substance.