歯根膜細胞スフェロイドの幹細胞性・骨分化能亢進のメカニズム解明

阐明增强牙周膜细胞球体干性和成骨分化潜力的机制

• 批准号: 22K09970
• 负责人: 臼井 通彦
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyushu Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09970/
• 关键词: スフェロイド; 歯根膜幹細胞; 歯根膜細胞; 骨分化; 幹細胞性

歯根膜幹細胞をスフェロイド培養すると、単層培養に比較して、幹細胞関連因子であるOCT4、NANOGの遺伝子発現、並びに蛋白発現が増強している一方で、スフェロイド培養した歯根膜細胞が単層培養した歯根膜細胞に比較して、形成される石灰化結節量を増加させ、さらに、マウス頭蓋骨欠損モデルに移植すると、新生骨量を増加させる。本研究の目的は、歯根膜幹細胞スフェロイドにおける「幹細胞性の上昇」「骨分化能の上昇」の相反する事象のメカニズムを明らかにすることである。以前、我々は、歯根膜幹細胞スフェロイドに単層培養歯根膜幹細胞に比較して、転写因子であるNR4A2が高く発現していることを明らかにした。歯根膜幹細胞スフェロイドにおけるNR4A2遺伝子のノックダウンアッセイと過剰発現アッセイを行った。NR4A2遺伝子の過剰発現は歯根膜幹細胞スフェロイドにおける幹細胞マーカーであるOCT4、NANOGの遺伝子発現に影響を与えなかった。しかし、NR4A2のsiRNAによるノックダウンではOCT4、NANOGの遺伝子発現を有意に抑制した。すなわち、NR4A2が歯根幹細胞スフェロイドに幹細胞性の維持に関わっている可能性が示唆された。我々は、今まで歯根膜幹細胞スフェロイド（直径200 um）を作製し、in vitroでの機能解析やin vivoでの移植実験に用いてきた。しかし、サイズの大きいものを用いた方が、より効率よくRNA抽出を行うことができる。そこで、より大きな歯根膜幹細胞スフェロイドを作製できるチップの作製を行った。

In comparison with the culture of dental root membrane stem cells in single layer culture, stem cell-related factors increased in OCT4, NANOG gene production and protein production, and in comparison with the culture of dental root membrane cells in single layer culture, the amount of calcified nodules formed increased in single layer culture, the amount of calcareous nodules formed increased in single layer culture, and the new bone mass increased in single layer culture. The purpose of this study is to reverse the phenomenon of "stem cell property increase" and "bone differentiation ability increase" in the development of dental root membrane stem cells. In the past, the expression of NR4A2 in cultured dental root membrane stem cells was higher than that in cultured dental root membrane stem cells The root membrane stem cells are derived from the NR4A2 gene. NR4A2 gene development affects dental root membrane stem cell development. 4. NANOG gene development affects dental root membrane stem cell development. The expression of OCT4 and NANOG was intentionally suppressed by NR4A2 siRNA. The possibility of maintaining stem cell properties is demonstrated by the presence of NR4A2 in stem cells. We now have root membrane stem cells (200 um diameter) for production, functional analysis in vitro and transplantation in vivo In the middle of the game, the game is played. The root membrane stem cells are cultured in vitro.

项目成果

Psychosocial Stress Induces Orofacial Mechanical Allodynia Due to the Enhancement of Transient Receptor Potential Ankyrin 1 Expression in Trigeminal Ganglion Neurons via the Increment of the Trace Amine-Associated Receptor 7f Expression

心理社会压力通过微量胺相关受体 7f 表达的增加，增强三叉神经节神经元中瞬时受体电位锚蛋白 1 的表达，从而诱发口面部机械异常性疼痛

• DOI: 10.3390/stresses3010006
• 发表时间: 2022
• 期刊: Stresses
• 作者: Ito Ko;Shinoda Masamichi;Soma Kumi;Ikutame Daisuke;Ikami Eiji;Mizuno Yosuke;Usui Michihiko;Asoda Seiji;Sato Tsuyoshi
• 通讯作者: Sato Tsuyoshi

Contact Co-culture of Osteoblasts and Sympathetic Neuronal Cells Promotes Differentiation of Both Cell Types

成骨细胞和交感神经细胞的接触共培养促进两种细胞类型的分化

• DOI: 10.21873/invivo.12871
• 发表时间: 2022
• 期刊: In Vivo
• 影响因子: 2.3
• 作者: OKUBO MASAHIKO;ITO KO;YAMAZAKI FUMIE;MIZUNO YOSUKE;ISOZAKI YUTA;ASODA SEIJI;USUI MICHIHIKO;SATO TSUYOSHI
• 通讯作者: SATO TSUYOSHI

Ropinirole inhibits inflammatory cytokine production in gingival epithelial cells and suppresses alveolar bone loss in an experimental rat model of periodontitis.

Ropinirole 在牙周炎实验大鼠模型中抑制牙龈上皮细胞中炎症细胞因子的产生并抑制牙槽骨丢失。

• DOI: 10.3892/etm.2022.11777
• 发表时间: 2022
• 期刊: Experimental and Therapeutic Medicine
• 影响因子: 2.7
• 作者: Yuta Isozaki;Tsuyoshi Sato;Rie Takagi;Ko Ito;Michihiko Usui;Masaaki Kawano;Sho Matsushita.
• 通讯作者: Sho Matsushita.

PDLIM5は歯肉上皮細胞の増殖と遊走に促進的に作用する

PDLIM5促进牙龈上皮细胞增殖和迁移

• 发表时间: 2022
• 期刊: 日本歯科保存学雑誌
• 作者: 臼井 通彦;菅 毅典;佐野 孝太朗;中島 啓介
• 通讯作者: 中島 啓介