合成致死性を用いた新しいがん治療法の検討~変異に応じた個別療法の確立を目指して~

DNA修復経路異常との合成致死をスクリーニングを試みるため、レンチウイルスを用いたCRISPRライブラリーの調製の準備を行なった。これと並行して、DNA修復異常でアルキル化剤に高感受性を示す遺伝子の候補を調べたところ、FANCD2を同定した。子宮頸がん細胞株でFANCD2をCRISPR/Cas9法でノックアウトすると、FANCD2欠損細胞は野生株と比べてミスマッチ修復に依存した細胞死が促進しており、野生株と比べてアルキル化剤に高感受性を示すことがわかった。FANCD2はDNA損傷に起因する複製ストレスに応答するタンパク質で、DNA修復経路の一つであるファンコニ経路の重要な因子である。FANCD2がアルキル化損傷応答にどのように関与するか調べるため、FANCD2の細胞内局在を調べたところ、アルキル化損傷依存してミスマッチ修復複合体と共局在することがわかり、ミスマッチ複合体によって引き起こされるDNA複製ストレスを処理していると予想された。ファンコニ経路はさまざまなDNA損傷に対する応答に関与するため、合成致死の新規のターゲットとなると考えられる。

DNA修復経路異常との合成致死をスクリーニングを試みるため、レンチウイルスを用いたCRISPRライブラリーの調製の準備を行なった。これと並行して、DNA修復異常でアルキル化剤に高感受性を示す遺伝子の候補を調べたところ、FANCD2を同定した。子宮頸がん細胞株でFANCD2をCRISPR/Cas9法でノックアウトすると、FANCD2欠損細胞は野生株と比べてミスマッチ修復に依存した細胞死が促進しており、野生株と比べてアルキル化剤に高感受性を示すことがわかった。FANCD2はDNA損傷に起因する複製ストレスに応答するタンパク質で、DNA修復経路の一つであるファンコニ経路の重要な因子である。FANCD2がアルキル化損傷応答にどのように関与するか調べるため、FANCD2の細胞内局在を調べたところ、アルキル化損傷依存してミスマッチ修復複合体と共局在することがわかり、ミスマッチ複合体によって引き起こされるDNA複製ストレスを処理していると予想された。ファンコニ経路はさまざまなDNA損傷に対する応答に関与するため、合成致死の新規のターゲットとなると考えられる。