ブリ類の初回成熟年齢を決定する遺伝要因とその機構の解明

阐明决定黄尾鱼初成熟年龄的遗传因素和机制

基本信息

  • 批准号:
    13J03031
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.62万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2013
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2013 至 2015-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1)ブリ類における血中の2種生殖腺刺激ホルモン(FSHおよびLH)測定系の開発カンパチの血中FSHおよびLH測定のための酵素免疫測定法(ELISA)に用いる、リコンビナントFSHおよびLHと、両GtHに特異的な抗体を作製した。ヒト腎臓293細胞に、カンパチFSHβまたはLHβにカンパチGPαを連結した組換えカンパチFSHまたはLHを発現させ、精製した。同様に、カンパチFSHβまたはLHβにウサギGPαを連結した、組換えキメラFSHまたはLHを発現させて精製し、これらのキメラGtHをそれぞれ家兎に免疫して抗血清を得た。IgG精製後、直接吸着法によるELISAにより、いずれのIgGもカンパチFSHまたはLHの検出に有効であった。本研究により、ブリ類の2種GtHの測定が可能となった。2)ブリ類の早熟マーカーの探索①魚体採集 : 1歳の野生カンパチ個体を採捕し、約2年間飼育して初回成熟(3歳)に達した最初の産卵期(6月)に、卵巣組織の一部採取を実施し、卵径により性成熟の有無(初回成熟したか否か)を判定した。同時に、鰭の一部を採取した。②DNA抽出 : ①で採集した全個体の鰭組織より、それぞれDNAを抽出し、凍結保存した。③メラノコルチン4型受容体(MC4R)の多型解析 : カンパチのMC4Rの塩基配列を決定し、遺伝子多型を解析した。まず、カンパチMC4Rの全塩基配列を決定した。得られた塩基配列をもとに、カンパチMC4R特異的なプライマーを設計し、②で得た各個体のDNA試料を鋳型としてダイレクトシークエンスを行った。結果、多くの個体で変異が見られたが、ほとんどはアミノ酸置換を伴わなかった(サイレント変異)。またヘテロ接合型のミスセンス変異が3個体で生じていたが、成熟の有無との関連は見られなかった。
1) the detection of two kinds of gonadal stimulation (FSH stimulation LH) in blood was performed. The detection of FSH in blood was performed by enzyme immunoassay (ELISA). The enzyme immunoassay (ELISA) was performed by using antibodies against gonadal stimulation (FSH), gonadal LH and GtH. Cell number 293, FSH β cell, LH β cell, GP α link, FSH cell, FSH cell, LH cell, cell. The antiserum was obtained by immunizing with FSH β, FSH β, GP α, FSH, LH, GtH and antiserum. After the IgG was refined, the direct inhalation method was used to treat ELISA, IgG, FSH, LH, and so on. In this study, two kinds of GtH tests may fail. 2) study on precocious embryos: 1 set: 1 wild oysters were caught and the first mature stage (3 years) reached the initial egg stage (June) in about 2 years. The egg tissue was used to determine whether the sexual maturity was successful or not in the egg tissue. At the same time, we will collect and collect information from each other. 2DNA extraction: 1. Collect the full body tissue, extract the DNA, and save the file. (3) Polymorphism analysis of type 4 receptacles (MC4R): determination of subtypes and analysis of subpolymorphisms. The column "decision" is based on the whole base of the "MC4R". The data base is equipped with the device design of the MC4R special device, and the data of each DNA system is obtained. Results: the results showed that there were significant differences between the two groups, and there were significant differences between the two groups. In the joint type, there are three cases in which the baby is born, and the mature one is full-blown.

项目成果

期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
カンパチGtH受容体の同定と卵巣における遺伝子発現の周年変化
鰤 GtH 受体的鉴定和卵巢基因表达的年度变化
  • DOI:
  • 发表时间:
    2014
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Yui Imanaga;Mitsuo Nyuji;et al.;Lully Miura;Naoyuki Sakumichi and Hideo Suganuma;入路光雄ほか
  • 通讯作者:
    入路光雄ほか
飼育マアジの卵黄形成阻害に関する内分泌学的解析
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Yui Imanaga;Mitsuo Nyuji;et al.;Lully Miura;Naoyuki Sakumichi and Hideo Suganuma;入路光雄ほか;Lully MIURA;Naoyuki Sakumichi and Hideo Suganuma;Hideo Suganuma and Naoyuki Sakumichi;三浦瑠麗;入路光雄ほか
  • 通讯作者:
    入路光雄ほか
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    2016
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  • 资助金额:
    $ 1.62万
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    2013
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    $ 1.62万
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    $ 1.62万
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