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単一運動ニューロンcDNA比較による軸索ガイダンス分子の単離と機能解析

通过比较单个运动神经元 cDNA 的轴突引导分子的分离和功能分析

基本信息

批准号：
09878182
负责人：
調恒明
金额：
$ 1.09万
依托单位：
大分医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09878182/
关键词：
運動ニューロン神経回路形成サブトラクション

项目摘要

運動ニューロンの軸索ガイダンスに関わるcDNAを単離することを目的として、サブトラクションクローニングを行い、これまでに以下の結果を得た。1. 方法ニワトリ4.5日胚から、胸部、および腰部脊髄を別々に単離し、パンニング法により運動ニューロンを精製し、ここからmRNAを調製した。cDNAに変換した後、制限酵素処理し、両端にリンカーをつけ、このリンカーを用いてPCR法により増幅した。腰部運動ニューロンcDNAから、胸部運動ニューロンcDNAをビオチンアビジン法を用いて差し引き、さらにこの一部をシークエンスゲル上にdisplayし、特異的発現を示す断片を単離した。これをベクターに繋ぎ、塩基配列を決定しデータベースを照合して、配列の相同性を調べた。2. 結果1つはごく最近クローニングされたショウジョウバエRoundabout(Robo)遺伝子のニワトリホモログであることが判明した。Roboは、神経軸索先端の成長円錐に特異的に発現し、正中線を越えるプロセスを制御している新たな受容体分子として、University of Ca1iforniaのCorey GoodmanらによりCellに報告された。Roboのin situ hybridizationを行い、運動ニューロン、体節に発現していることを明らかにした。この分子のニワトリ運動ニューロンにおける機能を明らかにしたいと考えている。またその他の分子については現在、探索を続けている。

The following results were obtained from the analysis of cDNA sequences related to the axis of motion. 1. Methods: 4.5-day embryo, chest, waist and spine differentiation, isolation, separation, purification, and modulation of mRNA After cDNA conversion, restriction enzyme processing, terminal detection, amplification by PCR Lumbar movement, chest movement, cDNA translation, and the use of different methods of translation, translation. In this paper, the author discusses the relationship between the structure and the structure of the system. 2. Result 1: The most recent version of this article is called Roundabout(Robo). Robo, axon apex growth cone specific discovery, median line, control, new receptor molecule, University of California Corey Goodman report Robo's in situ hybridization, sports, sports The molecular structure of the molecule is very simple. He is a member of the group, and he is a member of the group.