コンディショナルジーンターゲッティングによる中枢アドレナリン神経の循環調節機能研究

条件基因打靶研究中枢肾上腺能神经循环调节功能

• 批准号: 08877007
• 负责人: 桑木 共之
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Chiba University (1997)The University of Tokyo (1996)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877007/
• 关键词: コンディショナルジーンターゲッティング; 中枢アドレナリン神経; 循環調節; 交感神経; PNMT; Cre-loxP; テトラサイクリン; アポトーシス遺伝子; コンディショナルジーンターゲティング; Cre-LoxP; LarZ

循環調節中枢として最も重要な、吻側延髄腹外側部(RVLM)におけるアドレナリン産生神経細胞であるC1ニューロンと心臓血管運動ニューロンの同一性を検討するため、アドレナリン産生酵素PNMT遺伝子発現の組織特異性に注目し、これとCre-loxPシステム、テトラサイクリン誘導による遺伝子発現のスイッチングシステムを組み合わせることにより、(1)PNMT遺伝子を中枢神経特異的に破壊しC1細胞のアドレナリン産生機能を廃絶させたマウス、または神経細胞の中でC1細胞を特異的に破壊したマウスを作成し、(2)そのマウスの交感神経活動および血圧を測定することを試みた。目的の全てを達成する事は出来なかったが、その途中の段階とし以下に示す重要な進展を得た。1.マウスPNMT遺伝子をクローニングし、exon-intron構造を決定して従来報告されているラット・ヒトとの相同性を確認した。2.テトラサイクリンによる遺伝子発現誘導システム作成のため、テトラサイクリン反応性cis配列にレポーター遺伝子(LacZ)をつないだトランスジェニックマウスを樹立した。3.2のマウスでテトラサイクリン反応性転写活性因子(tetR)によって遺伝子発現のスウィッチングが実際に起こることをより解析しやすい系で確認するため、最初に血管系特異的にtetRを発現するトランスジェニックマウスを樹立した。4.細胞破壊を起こす遺伝子として、アポトーシス遺伝子(caspase3(CPP32/Yama)をPCRクローニングし、in vitroにおけるアポトーシス誘導を確認した。5.マウスの腎交感神経活動の直接記録に世界で初めて成功し、目的マウスが出来た時の評価系は確立された。

Cycling regulatory center is the most important, rostral ventrolateral region (RVLM), and the identity of C1-producing neurons and cardiovascular motor cells is discussed. Tissue specificity of PNMT gene expression is discussed. Cre-loxP gene expression is induced by C1-producing neurons, and the gene expression is induced by C1-producing neurons.(1)PNMT gene is a central neurocyte-specific disruption of C1 cells and the production of neurocyte-specific disruption of C1 cells;(2) PNMT gene is a central neurocyte-specific disruption of C1 cells and the production of neurocyte-specific disruption of C1 cells; and (3) PNMT gene is a central neurocyte-specific disruption of C1 cells and the production of neurocyte-specific disruption of C1 cells. The achievement of the goal is a major achievement. 1. The identity of PNMT gene is confirmed by the determination of exon-intron structure. 2. To create a list of the information generated by the information generation system, to create a list of the information generated by the information generation system, to create a list of the information generated by the information generation system. 3.2 The expression of tetR is determined by the analysis of the initial expression of tetR, which is specific to the vascular system. 4. Cell disruption and gene expression (caspase3(CPP32/Yama)) were confirmed by PCR. 5. The direct recording of renal sympathetic activity in the world is successful, and the evaluation system is established.

项目成果

Linz,G.Y.: "Sympathetic Reflexes to baro-and chomoruptn stimulation in rild-type and edcthelin-1 deficient mice" Japanese Journal of Physiolozy. 46(Suppl). S45-S45 (1996)

Linz，G.Y.：“rild 型和 edcthelin-1 缺陷小鼠对压力和 chomoruptn 刺激的交感反射”日本生理学杂志。

熊田衛: "ノックアウトマウス:循環研究の新しい資源" 心臓. 29. 77-79 (1997)

Mamoru Kumada：“基因敲除小鼠：循环研究的新资源” Cardiac 29. 77-79 (1997)

熊田 衛: "循環中枢の新しい考え方" Clinical Neuro Science. 15(4). 377-379 (1997)

Mamoru Kumada：“关于循环中心的新思考方式”临床神经科学 15（4）377-379（1997）。

Linz,G.Y.: "Rencl syrnpathetic rerve activity and its control by baro-and chimo-receptor reflex in endcthelin-1 deficient mice" Neuroscience Research. Suppl20. S78-S78 (1996)

Linz，G.Y.：“Endcthelin-1 缺陷小鼠中的 Rencl 交感神经活动及其通过压力和嵌合受体反射的控制”神经科学研究。

熊田 衛: "高血圧症における神経・心血管・腎応答機能" 日本臨床. 55(8). 1982-1987 (1997)

Mamoru Kumada：“高血压中的神经、心血管和肾脏反应功能”，日本临床杂志 55(8)（1997 年）。