摘出胎児脳神経標本を用いた神経伝達物質欠損マウスの自律神経中枢の電気生理学的研究

使用分离的胎儿颅神经标本对神经递质缺陷小鼠自主神经中枢进行电生理学研究

• 批准号: 08270208
• 负责人: 桑木 共之
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08270208/
• 关键词: 摘出胎児脳神経標本; 延髄-脊髄標本; ノックアウトマウス; エンドセリン; 呼吸調節; 中枢化学感受性

多くの神経伝達(候補)物質は個体の生存にとって極めて重要である場合が多く、従ってその完全欠損体の多くは致死性であることが予想される。そこで、本研究の目的は、神経伝達物質欠損マウスの胎児から摘出した延髄-脊髄標本を用いて自律神経中枢の神経伝達機構の電気生理学的解析を行うことであった。本研究で用いる摘出ブロック標本は、上述の隘路を避けられるだけでなく、解剖学的構築が良く保たれているために、特定の生理機能を担った神経細胞についての研究が可能であるという長所がある。さらに、胎児あるいは新生時の脳神経は、その未熟さ故に可塑性も高く、本研究領域に適した実験材料である。本研究では、具体的に、エンドセリン(ET)-1遺伝子ノックアウトマウスを交配・維持し、完全欠損体の胎児を随時作成し、以下の実験に供した。対照として遺伝背景が同一の野性型の胎児を用いた。1.出産予定日に帝王切開により胎児を摘出し、完全欠損体から延髄-脊髄標本を素早く作成し酸素で飽和させた栄養液中で維持した。2.調べる神経伝達機構として、呼吸調節に注目し、第4頚髄前根に装着した吸引電極から、呼吸関連自発群放電頻度を記録し、グルタミン酸、エンドセリン、炭酸ガスなどの化学刺激に対する応答性を検討した。3.野性型胎児標本の場合には、いずれの刺激によっても再現性のある興奮反応が得られたが、ET-1遺伝子ノックアウトマウスから得られた標本の場合には、炭酸ガス刺激による興奮反応のみが有意に減弱していた。4.実験終了後、組織学的検討を加えたが、ET-1遺伝子ノックアウトマウスにおいても、延髄及び脊髄に明らかな異常を認めなかった。以上の結果から、中枢神経、とくに延髄に存在する内因性のET-1は、中枢化学感受性に重要な役割を果たしていると結論された。

Many kinds of mental health (candidate) substances are very important for the survival of individuals, and many kinds of mental health (candidate) substances are very important for the survival of individuals, and many kinds of mental health (candidate) substances are very important. The purpose of this study is to analyze the electrophysiology of the neurotransmitter mechanism in the autonomic nervous system. In this study, we used the method of extracting and removing the above-mentioned bottlenecks, and the anatomical structure was well protected, and the specific physiological functions were studied. In addition, in the case of children, the plasticity of the newborn brain is high, and the research field is suitable for the material. In this study, we established the specific conditions for mating, maintenance, and complete loss of fetus at any time. The background of the light is the same as the wild type. 1. The production of the sun to the emperor cut off the fetus, completely damaged body, delay-ridge plum early to make acid saturated in the nutrient solution to maintain 2. In addition, the frequency of respiratory self-release was recorded, and the response to chemical stimulation was discussed. 3. In the case of wild fetus, the excitation response is intentionally weakened due to the stimulation of carbon dioxide, and the excitation response is intentionally weakened due to the stimulation of carbon dioxide. 4. Histological examination after the end of the disease, ET-1 gene, etc. These results indicate that ET-1 is intrinsic to the central nervous system, and ET-1 is important to the central chemosensitivity.

项目成果

桑木 共之: "酸素および二酸化炭素検出の分子機構" Porphyrins. 5(1). 13-19 (1996)

Tomoyuki Kuwaki：“氧气和二氧化碳检测的分子机制”卟啉 5(1) (1996)。

T.Kuwaki: "Impaired ventilatory responses to hypoxia and hypercapnic in mutant mice deficient in endothelin-1" American Journal of Physiology. 270. R1279-R1286 (1996)

T.Kuwaki：“内皮素-1 缺陷的突变小鼠对缺氧和高碳酸血症的通气反应受损”美国生理学杂志。

T.Kuwaki: "Physiologial role of brain endothelin in the antral autonomic control:From peuron to knodsout mouse" Progress in Neurobiology. (in press). (1997)

T.Kuwaki：“脑内皮素在胃窦自主控制中的生理作用：从 peuron 到 knodsout 小鼠”神经生物学进展。

W.H.Cao: "Abnormal central respiratory mechanism in endothelin-1 deficient mice:a study in medulla-spinal cord preparation" Neuroscience Research. Suppl.20. S72-S72 (1996)

W.H.Cao：“内皮素-1缺陷小鼠中枢呼吸机制异常：髓质-脊髓制备的研究”神经科学研究。

T.Kuwaki: "Abnormalities of central respiratory mechanism in endothelin-1 gene knoched-out mice:a study in medulls-spinal cord preparation" Japanease Journal of Pharmacology. 71(Sup,2). 3279-3279 (1996)

T.Kuwaki：“内皮素-1基因敲除小鼠中枢呼吸机制的异常：髓质-脊髓制剂的研究”《日本药理学杂志》。